2.1. Требования к помещению для посева на стерильность.
Контроль стерильности простерилизованной продукции проводят при условиях, исключающих возможность вторичной контаминации, в специально оборудованных помещениях с соблюдением правил асептики.
Посев исследуемого материала желательно проводить в настольных боксах с ламинарным потоком воздуха. Эти боксы размещают в отдельных помещениях бактериологической лаборатории.
При отсутствии боксов с ламинарным потоком воздуха контроль стерильности проводят в боксированных помещениях (бокс с предбоксником). Общая площадь бокса должна быть не менее 3 кв.м.
2.1.1. В боксированном помещении стены должны быть окрашены масляной краской или выложены кафельной плиткой, не должны иметь выступов, карнизов, щелей, трещин; пол в боксе и рабочий стол должны быть покрыты линолеумом, стенки и ножки стола покрашены масляной краской.
2.1.2. Боксы оборудуют приточно-вытяжной вентиляцией (с преобладанием притока над вытяжкой), в них подается стерильный воздух, прошедший через бактериальные фильтры с материалом Петрянова.
2.1.3. В боксе и предбокснике устанавливают настенные (БОН) и потолочные (ОБП) ультрафиолетовые облучатели из расчета 2 вт. удельной мощности ламп, создающих прямое излучение, на 1 кв.м помещения. Облучатели размещают на высоте 2-2,5 м от пола.
2.2. Подготовка бокса, инструментов и персонала к работе.
2.2.1. Ежедневно до проведения работы помещения бокса и предбоксника подвергают тщательной обработке. Стены, пол, поверхности инвентаря протирают 3% раствором перекиси водорода с 0,5% моющего средства (Триас-А, Астра, Лотос). В случае обнаружения в воздухе грибов или споровых форм микроорганизмов влажную уборку проводят 6% раствором перекиси водорода с 0,5% выше перечисленных моющих средств. Описание приготовления дезинфицирующих растворов и правила пользования растворами перекиси водорода изложены в разделе 3.
Внутреннюю поверхность настольного бокса обрабатывают также, как и помещение бокса. Через 45-60 минут после обработки в бокс вносят все необходимые для работы материалы и инструменты, кроме образцов изделий.
2.2.2. Перед внесением материалов в настольном боксе включают вентиляцию на время, достаточное для обеспечения полного обмена воздуха в нем.
2.2.3. За 1,5-2 часа до начала работы в боксе и предбокснике на 1-1,5 часа включают бактерицидные лампы.
2.2.4. Инструменты, посуду и спецодежду, используемые в работе, предварительно стерилизуют в паровом стерилизаторе. Металлические, стеклянные и тканевые изделия обрабатывают при следующем режиме: температура 132 град.С +/-2 град.С, время стерилизационной выдержки 20 минут; изделия из резины (перчатки и т.д.) - при температуре 120 град.С +/-2 град.С в течение 45 минут.
В процессе работы вспомогательный инструмент 2-3 раза заменяют новым стерильным комплектом.
2.2.5. Перед входом в бокс работники лаборатории тщательно моют руки теплой водой с мылом и щеткой, вытирают стерильным полотенцем, надевают в предбокснике на ноги бахилы, стерильные халаты, 4-слойные маски, шапочки, на руки - стерильные перчатки.
2.2.6. В процессе посева в боксе регулярно проверяют обсемененность воздуха. Для этого на рабочий стол ставят 2 чашки с питательным агаром, открывая их на 15 минут, затем чашки помещают в термостат при температуре 37 град.С на 48 часов.
Допускается рост не более трех колоний неспорообразующих сапрофитов.
В случае роста на чашках более 3 колоний проведение дальнейших работ в данном боксе запрещается, в нем дополнительно проводят тщательную обработку 6% раствором перекиси водорода с 0,5% моющих средств.