Действующий

О мерах по совершенствованию профилактики и лечения ВИЧ-инфекции в Российской Федерации

Таблица 1

Возможные ошибки при проведении ИФА


	Типы дефекта	Видимые проявления	Возможные причины дефекта
1	Высокий фон	Значение оптической плотности в лунках с отрицательными сыворотками превышает 0,2 ед.	- неправильно приготовлено разведение сывороток, - неправильно проводилась отмывка планшетов, - неправильно приготовлен конъюгат, - неправильно приготовлен субстрат, - краситель плохого качества (раствор красителя имеет желтый цвет), заводской брак
2а	Слабый сигнал	Значение оптической плотности положительного контроля ниже минимального значения оптической плотности, указанного в инструкции, значение оптической плотности положительных сывороток не превышает 0,4 ед.	- несоблюдение правил хранения тест-систем, что приводит к нарушению связи антигена с носителем, - неправильное разведение контрольных и испытуемых сывороток, - неправильное разведение и хранение разведенного конъюгата, - неправильное разведение и хранение перекиси водорода, - заводской брак при изготовлении тест-системы
2б	Слабый сигнал положительного контроля	Значение оптической плотности положительного контроля не превышает 0,4 ед.	- неправильное разведение и хранение разведенных контрольных сывороток, - заводской брак при изготовлении контрольной сыворотки
3	Отсутствие сигнала	В лунках с позитивным контролем и позитивными сыворотками не произошло окрашивание	- не внесен конъюгат, - неправильно приготовлен субстрат (не добавлена перекись водорода), - не внесен антиген в лунки при изготовлении тест-системы

При постановке ИФА в случае получения положительного результата анализ проводится еще 2 раза (с той же сывороткой). При получении хотя бы еще одного положительного результата сыворотка направляется в референс-лабораторию.

1.2.3.3. Иммунный блотинг.

В настоящее время для подтверждения специфичности первичного положительного результата чаще всего используется метод иммунного блотинга-Wester N blot. Принцип метода заключается в выявлении антител к определенным белкам вируса, иммобилизованным на нитроцеллюлозную мембрану. В организме человека образуются антитела к ряду компонентов вируса, данные об этих антигенах приводятся в таблице.