Приложение 8
УТВЕРЖДЕНО
Приказ Минздрава России
от 09.01.98 N 2
ИНСТРУКЦИЯ
по определению резус-принадлежности крови
на плоскости без подогрева и по изготовлению
стандартной сыворотки и реактива антирезус,
предназначенных для этой цели
Общие сведения
Методы определения резус-принадлежности на плоскости без подогрева позволяют быстро проводить исследование без применения особого лабораторного оборудования непосредственно у постели больного, а также у доноров как в единичных случаях, так и при массовых обследованиях.
Методы основаны на использовании сывороток антирезус, изготовленных в сочетании с коллоидными растворами (альбумин, полиглюкин), в присутствии которых неполные резус-антитела приобретают способность агглютинировать резус-положительные эритроциты на плоскости при комнатной температуре, аналогично реакции по определению групп крови ABO.
Наиболее удобными для практики являются методы определения на плоскости без подогрева при помощи сыворотки антирезус, изготовленной в сочетании с альбумином и при помощи реактива антирезус, изготовленного из сыворотки антирезус в сочетании с сухим полиглюкином и альбумином.
1. Определение резус-принадлежности на плоскости
без подогрева при помощи сыворотки антирезус,
приготовленной с альбумином
(прилагается при выдаче сыворотки)
Оснащение
а) специально приготовленная универсальная сыворотка антирезус анти-D в комплекте с контрольной сывороткой;
б) белая пластинка со смачиваемой поверхностью;
в) изотонический раствор NaCl;
г) стеклянные палочки.
Для исследования используют кровь, полученную непосредственно из места укола пальца или взятую заранее в пробирку со стабилизатором, но не более 2 суток хранения при 4-8 град.С.
Техника реакции
На пластинке надписывают фамилию и инициалы лица, кровь которого исследуется и, сделав соответствующие обозначения, наносят на нее в две точки: слева по 2 капли сыворотки антирезус и справа по 2 капли контрольной сыворотки. Рядом с этими каплями наносят по 1 капле исследуемой крови. Кровь тщательно смешивают с сывороткой стеклянной палочкой и размазывают на пластинке до получения тонкого слоя. Затем пластинку периодически покачивают в течение 4-5 минут и добавляют в обе смеси по 1 капле изотонического раствора NaCl для снятия возможной неспецифической агглютинации. Наблюдение за ходом реакции продолжают до истечения 5 минут, после чего учитывают результат.
Трактовка результата
Если слева, то есть с сывороткой антирезус, произошла агглютинация эритроцитов, а справа (контроль) ее нет - кровь остается равномерно окрашенной, без признаков агглютинации, это значит, что исследуемая кровь резус-положительная (Rh+).
Если в обеих каплях агглютинация отсутствует, это значит, что исследуемая кровь резус-отрицательная (rh-).
При наличии агглютинации в контрольной капле, что может произойти при некоторых заболеваниях, например, за счет аутоантител, необходимо исследовать кровь повторно другими методами, желательно в лабораторных условиях.
2. Определение резус-принадлежности при помощи реактива
антирезус, изготовленного с использованием
сухого полиглюкина (прилагается при выдаче реактива)
Оснащение
а) специально приготовленный реактив антирезус анти-D в комплекте с контрольным реактивом;
б) белая пластинка со смачиваемой поверхностью;
в) изотонический раствор NaCl;
г) стеклянные палочки.
Для исследования используют кровь, полученную непосредственно из места укола пальца или взятую заранее в пробирку со стабилизатором не более чем за 2 суток до исследования. Кровь хранят при 4-8 град.С.
Техника реакции
На пластинке надписывают фамилию и инициалы лица, кровь которого исследуется и, сделав соответствующие обозначения, наносят на нее слева 1 каплю реактива антирезус и справа - 1 каплю контрольного реактива, затем добавляют и к реактиву антирезус, и к контрольному реактиву по 1 капле густой взвеси исследуемой крови.
Кровь тщательно смешивают с реактивом и размазывают по пластинке стеклянной палочкой тонким слоем. Затем пластинку периодически покачивают в течение 3-4 минут и добавляют в обе смеси для исключения неспецифической агглютинации по 5-8 капель изотонического раствора NaCl.
Наблюдение за ходом реакции продолжают до истечения 5 минут, после чего учитывают результат.
Трактовка результата
Если слева, т.е. с реактивом антирезус, произошла агглютинация эритроцитов, а справа (в контроле) ее нет - это значит, что исследуемая кровь резус-положительная (Rh+).
Если в обеих каплях агглютинация отсутствует, это значит, что исследуемая кровь резус-отрицательная (rh-).