Методические рекомендации по использованию поведенческих реакций животных в токсикологических исследованиях для целей гигиенического нормирования

1. ПОДГОТОВИТЕЛЬНЫЙ ЭТАП

1. Выбор животных и условия их содержания.

В зависимости от условий опыта (острые, подострые или хронические), животные отбираются по возрасту и массе тела. Например, белые крысы и мыши должны иметь следующие параметры:

Таблица 1

Особое внимание обращают на внешний вид животных (блеск шерстных покровов, опрятность, отсутствие внешних признаков болезни, дефекты онтогенетического развития и т.п.).

Работать необходимо с половозрелыми особями генетически чистых линий - Вистар и др., а при отсутствии таковых - с беспородными животными. В качестве генетического стандарта мышей рекомендуется линия SHK.

На всех этапах изучения поведения животных должны строго соблюдаться одинаковые условия их содержания, ухода, исследований:

1) постоянная экспериментальная обстановка (отдельное помещение со стандартным освещением, изолированное от посторонних раздражителей),

2) не более 1-2 экспериментаторов-исследователей,

3) полноценный пищевой рацион, богатый витаминами,

4) одинаковое время кормления и исследования с учетом биоритмов поведенческих реакций,

5) содержание животных в клетках в количестве не более 10 особей одного пола,

6) четкая маркировка каждого животного,

7) обработка переносного оборудования или закрепление его за каждой экспериментальной группой.

Исследования с помощью метода "открытое поле" проводятся в затемненном помещении. При измерении двигательной активности требуется проводить тщательную обработку площади манежа во избежание воздействия запаховых раздражителей, особенно при работе с разным полом животных. Для каждого эксперимента при определении поведенческих реакций желательно выделить отдельную группу (количество животных подбирается в зависимости от вариабельности показателя, но не менее 12 в группе) на каждый метод, так как в процессе исследования может утрачиваться "новизна раздражителя".

Наблюдение полового поведения нужно проводить в специальной комнате, в которой присутствуют только экспериментаторы (1-2 человека) и животные. Для наблюдения удобно использовать специальные клетки с передней стеклянной стенкой.

Для проведения эксперимента следует отбирать половозрелых здоровых животных. При этом необходимо учитывать влияние индивидуального опыта животных. Известно, что самцы крыс, имеющие опыт спаривания, предпочитают запах самок в эструсе запаху самок, не готовых к спариванию (Beach, 1947). У самцов, не имеющих соответствующего опыта, а также у кастрированных самцов, такого предпочтения не отмечалось. Следует иметь в виду, что готовность к спариванию и стремление контактировать с самцами у самок проявляется только в период проэструса и эструса (Eliasson, Меуеrson, 1975). Кроме того, в эксперименте не рекомендуется отбирать животных, выращенных в изоляции, так как, по данным некоторых исследователей, (Gerall и соавт., 1967) это резко снижает их способность к спариванию по сравнению с теми животными, которые имели возможность контактировать с особями своего вида.

Наилучшее время наблюдения полового поведения - 23-24 - 1 час, поскольку у животных, ведущих ночной образ жизни (к которым относятся грызуны), в этот период наступает пик активности. В целях приближения ко времени пика активности наблюдение можно проводить через 5-6 часов после наступления темновой фазы. Для осенне-зимнего сезона это 21-23 часа.