ГОСТ 32637-2020 Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Повторное исследование пероральной токсичности на грызунах: 90-дневное

     5 Описание метода

5.1 Выбор видов животных

Предпочтительным видом животных являются крысы, хотя возможно использование других видов грызунов, например мышей. Если параметры, приведенные в настоящем стандарте, исследуют на других видах грызунов, следует привести подробное обоснование выбора вида, включая адаптацию к измерению параметров. Хотя биологически правдоподобно, что другие виды реагируют на токсические вещества аналогично крысе, использование более мелких видов может привести к увеличению вариабельности измерений конечных точек из-за технических проблем рассечения более мелких органов. Обычно используют лабораторные линии молодых, здоровых, половозрелых животных. Самки должны быть нерожавшими и небеременными. Введение доз следует начинать сразу после отъема, но в любом случае до того, как животным исполнится девять недель. В начале исследования отклонение массы тела используемых животных должно быть минимальным и не превышать ±20% средней массы тела для животных каждого пола. При проведении предварительного исследования перед долгосрочным исследованием хронической токсичности в обоих исследованиях следует использовать животных одной и той же линии и из одного источника.

5.2 Условия содержания и кормления

5.2.1 Все процедуры должны соответствовать местным стандартам ухода за лабораторными животными. Температура в помещении с подопытными животными должна быть (22±3)°С. Несмотря на то, что относительная влажность воздуха не должна быть ниже 30% и, предпочтительно, не превышать 70%, за исключением периода уборки помещения, оптимальное значение относительной влажности должно быть от 50% до 60%. Освещение в помещении должно быть искусственным, с чередованием периодов света (12 ч) и темноты (12 ч). Для кормления можно использовать обычный лабораторный рацион питания с неограниченной подачей питьевой воды. На выбор рациона может повлиять необходимость обеспечения соответствующей смеси исследуемого химического вещества при его введении в соответствии с настоящим методом. Следует избегать использования пищи и постилочного материала, которые могут содержать недопустимо высокие уровни гормонально активных веществ (например, фитоэстрогенов), способных или с большой вероятностью склонных помешать интерпретации результатов исследования. Известно, что высокий уровень фитоэстрогенов в лабораторной пище увеличивает массу матки у грызунов. Рекомендуемые уровни фитоэстрогенов в пище не должны превышать 350 мкг эквивалентов генистеина на грамм лабораторной пищи для грызунов.

5.2.2 Животных следует размещать небольшими группами одного пола. Животные могут быть размещены индивидуально, если это научно обосновано, и продолжительность одиночного содержания должна быть ограничена минимально необходимым периодом.

________________

См. [5]-[7].

5.3 Подготовка животных

Для исследования используют здоровых животных, прошедших акклиматизацию к лабораторным условиям не менее 5 дней и не подвергавшихся ранее экспериментальным процедурам. Подопытных животных характеризуют по виду, линии, источнику, полу, массе тела и/или возрасту. Животных распределяют в контрольную и подопытные группы случайным образом. Клетки с животными располагают таким образом, чтобы свести к минимуму потенциальное воздействие от размещения клеток. Каждому животному присваивают уникальный идентификационный номер. Для индивидуальной идентификации животных используют наименее инвазивные методы, такие как кольцевание, электронные бирки, микрочипирование и биометрическую идентификацию.

5.4 Подготовка доз

5.4.1 Исследуемое вещество вводят через желудочный зонд, добавляют в пищу или растворяют в питьевой воде. Способ перорального введения зависит от цели исследования и физических/химических свойств исследуемого материала.

5.4.2 При необходимости исследуемое вещество растворяют или суспендируют в подходящем растворителе. Рекомендуется (при возможности) в первую очередь использовать водный раствор/суспензию, затем масляный раствор/эмульсию (например, в кукурузном масле) и потом растворы в других растворителях (носителях). Для любых растворителей (носителей), кроме воды, должны быть известны их токсические характеристики. Необходимо определить гомогенность и стабильность исследуемого химического вещества в условиях введения.