2.1. В качестве тест-объекта используются препараты "Эколюм" лиофилизированных люминесцентных бактерий или иных препараты* бактериальной люциферазы. Методика основана на определении изменения интенсивности бактериальной биолюминесценции при воздействии химических веществ, присутствующих в анализируемой пробе, по сравнению с контролем. Люминесцентные бактерии оптимальным образом сочетают в себе различные типы чувствительных структур, ответственных за генерацию биоповреждений (клеточная мембрана, цепи метаболического обмена, генетический аппарат), с экспрессностью, объективным и количественным характером отклика целостной системы на интегральное воздействие токсикантов. Это обеспечивается тем, что люминесцентные бактерии содержат фермент люциферазу, осуществляющую эффективную трансформацию энергии химических связей жизненно важных метаболитов в световой сигнал на уровне, доступном для экспрессных и количественных измерений.
________________
* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.
2.2. Критерием токсического действия является измерение с помощью прибора "Биотокс-10" интенсивности биолюминесценции тест-объекта под воздействием химических соединений, содержащихся в экстрактах ПК продукции по сравнению с раствором, не содержащей токсических веществ, или эталонной пробой. Уменьшение интенсивности биолюминесценции пропорционально токсическому эффекту.
При изучении токсикологических свойств ПК продукции и ее химических ингредиентов люминесцентный бактериальный тест показывает хорошую корреляцию с их действием на высшие животные, метод Драйзе, культуры клеток человека.
Токсическое действие исследуемой пробы определяется по ингибированию интенсивности ее биолюминесценции за 30 мин (в экспрессном варианте - 5 мин) период экспозиции. Количественные оценки тест-реакции выражаются в виде безразмерной величины - индекса токсичности "Т".
2.3. Индекс токсичности "Т", равный отношению , где и соответственно интенсивность биолюминесценции контроля и опыта при фиксированном времени экспозиции исследуемой пробы с бактериальным препаратом.
Методика допускает три пороговых уровня индекса токсичности:
1 уровень - допустимая степень токсичности образца индекс токсичности Т меньше 20;
2 уровень - образец токсичен индекс Т равен или больше 20 и меньше 50;
3 уровень - образец сильно токсичен индекс токсичности Т равен или более 50.
Выбор эталонных разведений определялся результатами сравнительной оценки исследования общей токсичности и кожно-раздражающего действия ПК продукции в эксперименте на лабораторных животных и определения индекса токсичности перечисленных групп ПК продукции с учетом выше указанного допустимого интервала индекса токсичности.