Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции основана на выявлении антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 и вирусного антигена ВИЧ 1 в сыворотке (плазме) крови, а также, в особых случаях, выявлении провирусной ДНК ВИЧ в цельной крови и вирусной РНК ВИЧ в плазме крови (у детей первого года жизни и лиц, находящихся в инкубационном периоде).
Стандартным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции служит определение антител/антигена ВИЧ с помощью диагностических тестов ИФА или ИХЛА. Для подтверждения результатов на наличие антител к ВИЧ применяется подтверждающий тест (иммунный блот).
Алгоритм тестирования на наличие антител к ВИЧ 1,2 и антигена p24/25 ВИЧ 1:
1. На первом этапе в скрининговой лаборатории проводится первичное исследование сыворотки (плазмы) крови методом ИФА или ИХЛА.
При получении положительного результата анализ проводится последовательно еще 2 раза в этой же лаборатории, с той же сывороткой и в той же тест-системе (вторая сыворотка запрашивается только в случае недостаточного объема для дальнейшего исследования в арбитражной лаборатории). При получении в скрининговой лаборатории двух положительных результатов из трех постановок в ИФА или ИХЛА, сыворотка считается первично-положительной и направляется в арбитражную (референс) лабораторию для дальнейшего исследования.
2. На втором этапе в арбитражной (референс) лаборатории проводится подтверждение результатов скринингового исследования. В целях обеспечения контроля и учета исследований на территории Алтайского края арбитражная (референс) диагностика осуществляется в КГБУЗ "Алтайский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями".
3. Первично положительная сыворотка, поступившая из скрининговой лаборатории, повторно исследуется в ИФА во второй тест-системе другого производителя, отличающейся от первой по составу антигенов, антител или формату тестов. При получении отрицательного результата сыворотка повторно исследуется в третьей тест-системе другого производителя, отличающейся от первой и второй по составу антигенов, антител или формату тестов, имеющей аналогичные или более высокие аналитические характеристики (чувствительность, специфичность) по сравнению со скрининговой тест-системой. В случае получения отрицательного результата (во второй и третьей тест-системах) выдается заключение об отсутствии антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 и вирусного антигена ВИЧ 1. При получении положительного результата во второй и/или третьей тест-системе, сыворотка исследуется в подтверждающем тесте, лизатном или рекомбинантном иммунном блоте.
4. Для ускорения диагностики ВИЧ у беременных женщин допускается использование бесприборного иммунного блота в скрининговых лабораториях. Результаты исследования бесприборного иммуноблота, полученные в скрининговых лабораториях, должны подтверждаться в арбитражной (референс) лаборатории КГБУЗ "Алтайский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями".
5. Результаты, полученные в иммунном блоте, интерпретируются как положительные, отрицательные или неопределенные.
5.1. Положительными (позитивными) в иммунном блоте считаются пробы, в которых обнаруживаются антитела к 2 из 3 гликопротеинов ВИЧ.
5.2. Отрицательными (негативными) в иммунном блоте считаются пробы, в которых не обнаруживаются антитела ни к одному из антигенов ВИЧ.
5.3. Неопределенными (сомнительными) в иммунном блоте считаются пробы, с белковым профилем не отвечающим критериям позитивности, дающие положительный результат в одном или двух исследованиях на антитела/антиген ВИЧ 1, 2.
6. При получении положительных результатов 2-х тест-системах и отрицательных результатов в иммунном блоте и тесте для определения антигена p24/25, необходимо повторить исследование сыворотки (плазмы) крови через 2 недели в арбитражной лаборатории.
7. При выявлении антигена p24/25 ВИЧ 1 и получении отрицательного или неопределенного результата в иммунном блоте, пациент направляется к врачу-инфекционисту КГБУЗ "Алтайский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями" и его филиалы для клинического осмотра, сбора анамнеза, установления диагноза ВИЧ-инфекции или (если исследование не проводилось ранее) забора крови для определения РНК/ДНК ВИЧ методом амплификации нуклеиновых кислот (МАНК).
8. При получении отрицательного результата при определении РНК/ДНК ВИЧ проводятся повторные исследования на антитела/антиген ВИЧ через 3 месяца. Если через 3 месяца после первого обследования вновь будут получены неопределенные результаты в ИБ, ИФА или ИХЛА, а у пациента не будут выявлены факторы риска заражения, ДНК/РНК ВИЧ и клинические симптомы ВИЧ-инфекции, результат расценивается как ложноположительный.
9. У лиц, находящихся в инкубационном периоде, когда диагноз ВИЧ-инфекции поставлен на основании клинических и лабораторных показателей (выявление ДНК/РНК ВИЧ), следует провести повторное исследование на наличие антител к ВИЧ в иммунном блоте через 6 месяцев, а при получении пациентом антиретровирусной терапии через 12 месяцев.
10. Исследование первично положительных сывороток из скрининговых лабораторий частной системы здравоохранения в арбитражной (референс) лаборатории КГБУЗ "Алтайский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями" проводится на договорной основе.
11. В документе, выдаваемом арбитражной (референс) лабораторией по результатам исследования, указывается наименование тест-системы, ее срок годности, серия, результат ИФА (положительный, отрицательный), результат иммунного блота (перечень выявленных белков) и заключение: положительный, отрицательный, неопределенный.
12. При конфиденциальном исследовании документ должен содержать паспортные данные: полные Ф.И.О., полную дату рождения, адрес места жительства, код контингента. При анонимном обследовании документ маркируется специально установленным кодом.
Утверждена
Приказом
Главного управления
Алтайского края по здравоохранению
и фармацевтической деятельности
от 28 марта 2016 года N 282