Об утверждении условий применения биотехнологических методов искусственного осеменения племенных коров и телок (с изменениями на 16 марта 2022 года)

III. Хранение, оттаивание и оценка качества глубокозамороженной спермы

3.1. Глубокозамороженная сперма должна храниться в сосудах Дьюара в жидком азоте при температуре - 196°С. Контейнеры со спермой обязательно должны быть погружены в жидкий азот. Хранение спермы в парах азота недопустимо.

3.2. Использование канистр с решетчатым дном допускается при наличии специальных пластиковых стаканов-вкладышей.

3.3. Глубокозамороженная сперма должна храниться в металлических либо пластиковых контейнерах.

3.4. Объем жидкого азота в сосуде Дьюара должен составлять не менее 1/3 объема сосуда. Уровень азота в сосуде Дьюара определяют с помощью мерной линейки.

3.5. Повторное замораживание спермы после ее оттаивания не допускается.

3.6. Оттаивание глубокозамороженной спермы и оценка ее качества проводятся в соответствии с нижеприведенной последовательностью действий оператора по искусственному осеменению:

надеть чистую спецодежду;

вымыть стол и руки;

снять чехол с микроскопа;

протереть и подготовить микроскоп к работе;

отрегулировать освещение, подключить нагревательный столик, разместить на нем предметные и покровные стекла;

подготовить водяную баню с температурой +38-40°С (контроль температуры осуществляется с помощью термометра);

на чистый стол поставить тампонницу с тампонами, пропитанными 70% спиртом;

________________

При работе визоцервикальным способом дополнительно используются тампонницы с тампонами, пропитанными 96% спиртом.

на край стола положить перчатки, канцелярские скрепки, пипетки, ампулы, салфетки и другие инструменты для искусственного осеменения, необходимые согласно применяемой технологии искусственного осеменения;

достать пинцетом 1-й тампон, обработать пальцы рук и рабочую (свободную) часть стола, тампон выбросить;

достать пинцетом 2-й тампон, обработать подставку, установить ее на рабочую часть стола, тампон выбросить;

взять 3-й тампон и обработать инструменты для искусственного осеменения и ампулу или флакон с 0,9% раствором цитрата натрия (изотон), тампон выбросить;

обработанные инструменты для искусственного осеменения разместить на подставке;

вскрыть ампулу или флакон с 0,9% раствором цитрата натрия (изотон) и поместить в водяную баню или на нагревательный электростолик для разогрева на 3 минуты (кроме работ с облицованными гранулами).

При оттаивании спермы в соломинках:

взять 4-й тампон и обработать край пакета с одноразовым инструментом для искусственного осеменения, тампон выбросить;

угол пакета надрезать стерильными ножницами и выдвинуть чехол на 1/3 длины;

надеть защитные очки и перчатки;

открыть сосуд Дьюара, быстро (не более 5 секунд) охладить бранши стерильного пинцета (корнцанга) в жидком азоте и подтянуть контейнер с соломинками к верхней трети горловины сосуда;

извлечь стерильным, предварительно охлажденным в азоте пинцетом или корнцангом одну соломинку;

удалить колебательными движениями остатки азота (не более 5 секунд) и немедленно погрузить соломинку в водяную баню;