ГОСТ 31659-2024 (ISO 6579-1:2017) Микробиология пищевой цепи. Горизонтальный метод обнаружения, подсчета и серотипирования бактерий рода Salmonella. Часть 1. Обнаружение Salmonella spp.

     9.5 Подтверждение

9.5.1 Общие положения

Сочетание результатов биохимического и серологического тестирования указывает на принадлежность изолята к роду Salmonella. Для характеристики штаммов бактерий рода Salmonella необходимо полное серотипирование. Руководство по серотипированию описано в [16].

Взамен некоторых диагностических сред и тестов, указанных в 9.5.3 и B.8-B.12, для биохимического подтверждения принадлежности выделенных колоний к Salmonella spp. допускается использовать альтернативные (коммерческие) препараты, разрешенные к применению в установленном порядке.

Для четкого различия положительных и отрицательных биохимических реакций целесообразна проверка реакции среды каждого биохимического теста с контрольными штаммами, хорошо охарактеризованными на положительный и отрицательный результаты.

Примечания

1 Визуальное выявление колоний сальмонелл в значительной степени зависит от опыта сотрудника, и их внешний вид может несколько различаться не только от серовара к серовару, но также от партии к партии используемой селективной среды.

Допускается использовать миниатюризированные тест-наборы для биохимической идентификации бактерий рода Salmonella в соответствии с ГОСТ ISO 7218.

2 Допускается использовать альтернативные методы идентификации для подтверждения принадлежности выделенных культур к Salmonella spp, при условии подтверждения пригодности метода (в соответствии с требованиями ГОСТ ISO 7218).

9.5.2 Выбор колоний для подтверждения

Отмечают подозрительные колонии на каждой чашке (9.4). Выбирают хотя бы одну типичную или подозрительную колонию для пересева и подтверждения. Если результат окажется отрицательным, выбирают для пересева до четырех подозрительных колоний из различных комбинаций селективных сред обогащения и выделения, имеющих признаки роста.

Пересевают выбранные колонии на поверхность предварительно высушенной неселективной агаризованной среды (B.7) таким образом, чтобы обеспечить рост хорошо изолированных колоний. Инкубируют чашки с пересевами при температуре от 34°C до 38°C (6.3) в течение (24±3) ч.

В качестве альтернативы, если на селективной среде для пересева (9.4) имеются хорошо изолированные колонии (чистой культуры), для биохимического подтверждения допускается использовать подозрительную хорошо изолированную колонию с поверхности селективной среды. Стадия культивирования на неселективной агаризованной среде может затем быть выполнена параллельно с биохимическим тестированием, для проверки чистоты колонии, взятой с поверхности селективной агаризованной среды.

Для биохимического и серологического подтверждения необходимо использовать чистые культуры.

Примечание - Для эпидемиологических целей или при расследовании вспышек заболеваний целесообразно проводить подтверждение дополнительных колоний, например, пяти типичных колоний из каждой комбинации селективных сред для обогащения.