19. Отбор Проб должен проводиться специалистом в области ветеринарии в следующем порядке:
от восприимчивых животных должны отбираться моча в объеме 5-10 мл; кровь в объеме 5-10 мл с антикоагулянтом и 5-10 мл без антикоагулянта (или с фактором свертывания крови);
от трупов восприимчивых животных должны отбираться сердце, почка в невскрытой капсуле, мочевой пузырь с содержимым, фрагменты паренхиматозных органов массой 2-3 г, ликвор, транссудат из грудной и брюшной полостей, перикардиальная жидкость, спинномозговая жидкость объемом до 3 мл;
абортированный плод доставляется в лабораторию целиком или отбираются желудок с содержимым, сердце и паренхиматозные органы плода.
Трупы мелких восприимчивых животных до 10 килограмм должны направляться целиком.
Сборные Пробы не допускаются.
При невозможности отбора Проб в количестве, указанном в настоящем пункте, Пробы должны отбираться в максимально возможном количестве.
20. В случае если в изолированно содержащейся группе восприимчивых животных (или группе восприимчивых животных, для ухода за которыми требуется одно и то же оборудование и (или) инвентарь) содержится 100 и менее голов восприимчивых животных, пробы должны отбираться от каждого восприимчивого животного группы, более 100 голов - 10% от всего поголовья восприимчивых животных группы, за исключением восприимчивых животных-производителей. Пробы от восприимчивых животных-производителей должны отбираться от каждого восприимчивого животного-производителя.
21. Упаковка и транспортирование Проб должны обеспечивать их сохранность и пригодность для исследований в течение срока транспортировки. Отобранные Пробы охлаждаются, а на период транспортирования помещаются в термос со льдом или охладителем. Доставка Проб в лабораторию должна осуществляться специалистом в области ветеринарии в течение 10 часов с момента их направления.
Утечка (рассеивание) Проб во внешнюю среду не допускается.
Контейнеры, емкости с Пробами должны быть упакованы и опечатаны.
В сопроводительном письме к Пробам должны быть указаны вид животного, дата, время отбора Проб, дата последней вакцинации восприимчивых животных против лептоспироза, наименование вакцины, номер серии, дата выпуска и срок годности использованной вакцины, производитель вакцины либо информация о том, что вакцинация не проводилась, адрес места отбора Проб и (или) указание географических координат в пределах места отбора Проб, перечень Проб, основания для подозрения на лептоспироз, адрес и телефон, а также электронная почта (при наличии) специалиста в области ветеринарии, осуществившего отбор Проб.
22. Лабораторные исследования Проб проводятся с использованием следующих методов:
бактериологический метод (включающий микроскопию, выделение культуры возбудителя на питательных средах) с идентификацией выделенных культур, и (или) биологическая проба, и (или) молекулярно-биологические исследования методом полимеразной цепной реакции (далее - ПЦР);
серологические исследования методами РМА и (или) ИФА.
В случае выявления положительных результатов методом ИФА проводятся подтверждающие исследования методом РМА. В РМА используются лептоспиры серологических групп, циркулирующих на территории Российской Федерации.
23. Диагноз на лептоспироз считается установленным в одном из следующих случаев:
обнаружен возбудитель при микроскопическом исследовании в крови, или суспензии из органов восприимчивых животных, или в абортированном плоде, околоплодных водах, моче и (или) при постановке биологической пробы;
выделена и идентифицирована культура возбудителя, и (или) обнаружен его генетический материал методом ПЦР;
обнаружены антитела к возбудителю лептоспироза в сыворотке крови абортированного плода в диагностическом титре 1:10 и выше при серологическом исследовании методом РМА;
обнаружены антитела к возбудителю лептоспироза в сыворотке крови у 20% и более восприимчивых животных, от которых отобраны Пробы (далее - обследованные восприимчивые животные), в диагностических титрах 1:50 и выше у невакцинированных восприимчивых животных, 1:100 и выше у вакцинированных восприимчивых животных при серологическом исследовании в РМА.
Обнаружение антител в сыворотке крови менее чем у 20% обследованных восприимчивых животных при серологическом исследовании методом РМА или обнаружение антител в сыворотке крови восприимчивых животных при серологическом исследовании методом ИФА не может являться основанием при постановке диагноза на лептоспироз и должно подтверждаться иными методами исследований, указанными в пункте 22 Правил, серологическими исследованиями методом РМА Проб, повторно отобранных от восприимчивых животных с интервалом 7-10 календарных дней в соответствии с пунктом 19 Правил.
В случае исследования методом РМА Проб, повторно отобранных от восприимчивых животных, диагноз на лептоспироз будет считаться установленным при обнаружении антител у животных, не имевших их при первичном исследовании, или при нарастании титра антител в 4 и более раза.
Наличие антител в пробах крови, отобранных от восприимчивых животных, подвергавшихся лечению и вакцинации от лептоспироза, в диагностическом титре и выше, но без нарастания титра антител не является основанием для установления диагноза на лептоспироз.
24. Руководитель лаборатории в течение 12 часов после получения результатов лабораторных исследований на лептоспироз должен в письменной форме проинформировать руководителя исполнительного органа соответствующего субъекта Российской Федерации, осуществляющего переданные полномочия в области ветеринарии, специалиста госветслужбы, направившего Пробы на исследования, о полученных результатах.
В случае установления диагноза на лептоспироз руководитель лаборатории в течение 12 часов после получения результатов лабораторных исследований в письменной форме должен проинформировать ветеринарные (ветеринарно-санитарные) службы федеральных органов исполнительной власти в области обороны, в сфере внутренних дел, в сфере деятельности войск национальной гвардии Российской Федерации, в сфере исполнения наказаний, в сфере государственной охраны и в области обеспечения безопасности в случае поступления Проб с объекта, подведомственного указанным органам.
25. Руководитель исполнительного органа субъекта Российской Федерации, осуществляющего переданные полномочия в области ветеринарии, в течение 24 часов после установления диагноза на лептоспироз должен направить в письменной форме информацию о возникновении лептоспироза на территории соответствующего субъекта Российской Федерации высшему должностному лицу субъекта Российской Федерации, в федеральный орган исполнительной власти в области нормативно-правового регулирования в ветеринарии, федеральный орган исполнительной власти в области ветеринарного надзора.
26. При установлении диагноза на лептоспироз на объектах, подведомственных федеральным органам исполнительной власти в области обороны, в сфере внутренних дел, в сфере деятельности войск национальной гвардии Российской Федерации, в сфере исполнения наказаний, в сфере государственной охраны и в области обеспечения безопасности, уполномоченные должностные лица ветеринарных (ветеринарно-санитарных) служб указанных органов должны взаимодействовать с уполномоченными должностными лицами исполнительного органа субъекта Российской Федерации (на территории которого расположен соответствующий объект), осуществляющего переданные полномочия в области ветеринарии, или подведомственной ему организации по вопросам осуществления на подведомственных объектах мероприятий, предусмотренных Правилами.