ГОСТ 34735-2021 Методы испытаний по воздействию химической продукции на организм человека. Методы испытаний с применением реконструированного рогового эпителия человека (RhCE) для определения химической продукции, не требующей классификации опасности как вызывающей раздражение или серьезное повреждение глаз

Введение

Под серьезным повреждением глаз, в соответствии с Согласованной на глобальном уровне системой классификации и маркировки химической продукции Организации Объединенных Наций (СГС ООН) [1] понимают такие повреждения глазных тканей либо такое обусловленное физическими причинами существенное ухудшение зрения после воздействия на глаза исследуемой химической продукции, которые не могут быть полностью обратимы. Напротив, раздражение глаз, также описанное в рамках СГС ООН, обозначает изменения, происходящие в глазах после воздействия на них исследуемой химической продукции, которые являются полностью обратимыми. Исследуемую химическую продукцию, вызывающую серьезные повреждения глаз, необходимо относить к классу опасности 1, а вызывающую раздражение глаз - к классу опасности 2 в соответствии с классификацией СГС ООН. Исследуемая химическая продукция, которая не была классифицирована как способная вызывать раздражение или серьезное повреждение глаз, рассматривается как не отвечающая условиям для отнесения ее к классу опасности 1 или 2 (подклассы опасности 2A или 2B) согласно СГС ООН, т.е. как продукция, для которой класс опасности согласно СГС ООН отсутствует.

Оценивание проявлений серьезного повреждения/раздражения глаз обычно предполагает использование для этой цели лабораторных животных (Руководство OECD по проведению испытаний (OECD 405); впервые принято в 1981 г., пересмотрено в 1987, 2002 и 2017 гг.) [2]. Выбор наиболее подходящего метода исследований, а также реализация положений настоящего стандарта должны осуществляться с учетом требований Руководящего документа по интегрированным подходам к исследованиям и оценке (Integrated Approaches on Testing and Assessment - IATA) серьезного повреждения и раздражения глаз [3].

Общепризнанно, что в обозримом будущем не следует ожидать появления одного единственного метода in vitro, который мог бы полностью заменить метод in vivo Дрейза [2], [18], позволяющий спрогнозировать весь диапазон серьезного повреждения/раздражения глаз, вызываемого химической продукцией различных классов. Тем не менее выверенное сочетание нескольких альтернативных методов испытаний, реализуемое в рамках единых (многоуровневых) стратегий исследования, основанных на "восходящем"/"нисходящем" подходе, вполне может оказаться способным заменить собой вышеупомянутый метод Дрейза [19]. Предполагается, что применение "восходящего" подхода уместно для случаев, когда, исходя из уже имеющейся информации, способность исследуемой химической продукции вызывать раздражение глаз, предположительно, в недостаточной степени выражена для присвоения ей конкретного класса опасности, в то время как к "нисходящему" подходу следует прибегать в ситуациях, когда ее воздействие, по всей вероятности, должно приводить к серьезному повреждению глаз.

Применение методов EpiOcular EIT, SkinEthic HCE EIT, LabCyte CORNEA-MODEL24 EIT и MCTT HCETM EIT рекомендовано для определения химической продукции, не требующей классификации как вызывающей раздражение или серьезное повреждение глаз в рамках СГС ООН (класс опасности отсутствует согласно СГС ООН) [1] без необходимости проведения дальнейших исследований в рамках соответствующей стратегии испытаний на основе "восходящего"/"нисходящего" подхода, предложенного Scott et al., например, на ранних этапах реализации "восходящего" подхода либо на заключительных этапах реализации "нисходящего" подхода. В то же время методы EpiOcular EIT, SkinEthic HCE EIT, LabCyte CORNEA-MODEL24 EIT и MCTT HCETM EIT не предназначены для присвоения химической продукции класса опасности 1 согласно СГС ООН (серьезное повреждение глаз) или класса опасности 2 согласно СГС ООН (раздражение глаз). Разделение химической продукции на эти два класса опасности должно обеспечиваться на другом уровне выбранной стратегии исследования [3]. Исследуемая химическая продукция, которая идентифицируется как вызывающая раздражающее действие/серьезные повреждения глаз при применении методов EpiOcular EIT, SkinEthic HCE EIT, LabCyte CORNEA-MODEL24 EIT или MCTT HCE EIT, в дальнейшем подлежит обязательным исследованиям (in vitro и/или in vivo) для подготовки окончательного заключения о ее классификации (класс опасности отсутствует, класс опасности 2 или класс опасности 1 согласно СГС ООН), например, с использованием методов, установленных в [4], [5], [6], [7] либо в [2].

Настоящий стандарт распространяется на методы испытаний для оценки потенциальной опасности для глаз исследуемой химической продукции, исходя из ее способности вызывать цитотоксичность при контакте с тканью RhCE, которая определяется посредством использования тетразолиевого красителя (ТК) (например, MTT [3-(4,5-диметилтиазола-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия бромида; тиазолила синего тетразолия бромида; CAS N 298-93-1] для методов VRM1 и VRM2, WST-8 [2-(2-метокси-4-нитрофенил)-3-(4-нитрофенил)-5-(2,4-дисульфофенил)-2H-тетразолия, мононатриевой соли; CAS N 193149-74-5] для метода LabCyte CORNEA-MODEL24 EIT или WST-1 [4-[3-(4-йодофенил)-2-(4-нитрофенил)-2Н-5-тетразолио]-1,3-бензол дисульфоната; CAS N 150849-52-8] для метода MCTT HCE EIT) [20]-[22] (см. 4.3). Жизнеспособность тканей RhCE после воздействия испытуемой химической продукции определяют относительно тканей, обработанных отрицательной контрольной пробой (% жизнеспособности), и затем прогнозируют потенциальную опасность испытуемой химической продукции для глаз.

Стандарты результативности [23] являются пригодными для обеспечения проведения валидации новых или модифицированных методов испытаний in vitro, подобных методам, например, EpiOcular EIT, SkinEthic HCE EIT, LabCyte CORNEA-MODEL24 EIT и MCTT HCE EIT в соответствии с принципами [24], и обеспечивают возможность своевременного внесения соответствующих изменений в OECD 492 с целью включения в него этих новых методов. Присоединение к системе взаимного признания данных (Mutual Acceptance of Data - MAD) для методов испытаний, успешно прошедших валидацию в соответствии со стандартами результативности, гарантируется только при условии, что эти методы были одобрены и включены в OECD 492.