ГОСТ 34639-2020 Методы испытаний по воздействию химической продукции на организм человека. Раздражение кожи in vitro. Методы с использованием реконструированного человеческого эпидермиса

     3 Исходные положения и ограничения

3.1 Основное ограничение методов настоящего стандарта, предусматривающих использование моделей RhE, как свидетельствуют результаты полномасштабного проспективного исследования с целью их валидации [6], заключается в том, что их применение не обеспечивает возможность классификации химической продукции к дополнительному классу опасности 3 согласно СГС ООН (слабые раздражающие вещества) [1]. Порядок применения настоящего стандарта на территории стран-участниц определяется требованиями, действующими в сфере государственного регулирования этих стран. Полные сведения по оценке местного влияния химической продукции на кожу при ее однократном воздействии, приведены в Руководящем документе по интегрированным подходам к испытаниям и оценке (IATA) N 203 [3]. При использовании человеческой кожи следует руководствоваться требованиями национальных и международных этических норм и стандартов.

3.2 Настоящий стандарт предназначен для исследования раздражения кожи, являющегося показателем здоровья человека. Поскольку настоящий стандарт не содержит необходимой информации по определению разъедающего действия на кожу, на исследования разъедания кожи распространяется Руководство OECD 431, которое предусматривает использование такой же испытательной системы RhE, но с другим протоколом [6]. Настоящий стандарт предусматривает использование моделей RhE с человеческими кератиноцитами, которые имитируют органы-мишени человека при проведении испытаний in vitro. Кроме того, в нем непосредственно рассмотрен начальный этап механизма развития воспалительного процесса (разрушения клеток и тканей и, как следствие, локальной травмы), который наблюдается при раздражении кожи in vivo. В процессе валидации методов испытаний настоящего стандарта было исследовано большое количество химической продукции; всего базовый перечень для валидации насчитывал 58 наименований химической продукции [16], [18], [23]. Настоящий стандарт может применяться для исследований твердой, жидкой, полутвердой и воскоподобной продукции. Жидкая продукция может иметь водную или неводную основу; твердая может быть растворимой или нерастворимой в воде. По возможности твердая продукция перед исследованием должна быть измельчена до тонкого порошкообразного состояния; никакой другой предварительной обработки пробы не требуется. Оценка воздействия газов и аэрозолей не проводилась в рамках валидационных исследований [29]. Это означает, что, невзирая на теоретическую осуществимость испытаний газов и аэрозолей с применением технологий на основе RhE, настоящим стандартом такая возможность не предусмотрена.

3.3 Перед применением настоящего стандарта для смесей веществ с целью получения информации, применяемой в сфере государственного регулирования, следует изучить вопрос, может ли (если может, то почему) такое его использование обеспечить достижение приемлемых с точки зрения поставленной цели результатов. Изучение вопроса не требуется, если необходимость испытаний соответствующей смеси веществ прямо установлена действующими требованиями. Тем не менее с учетом того, что понятие "смесь" охватывает широкий диапазон видов и составов продукции, количество доступной информации об испытаниях различных смесей в настоящее время ограничено, в случае получения возможных свидетельств, указывающих на неприменимость положений стандарта к определенному виду таких смесей (например, в соответствии со стратегией, предложенной в публикации Eskes et al., 2012) [30]), настоящий стандарт не должен применяться для исследований данных смесей. Аналогичным образом следует поступать, если была подтверждена невозможность применения положений настоящего стандарта для проведения испытаний химических соединений определенных классов или химической продукции с определенными физико-химическими характеристиками.

3.4 Исследуемая химическая продукция, которая поглощает свет в том же спектральном диапазоне, что и МТТ-формазан, а также исследуемая химическая продукция, которая способна непосредственно восстанавливать витальный краситель MTT (до MTT-формазана), может препятствовать правильному определению жизнеспособности клеток и требует дополнительного использования контрольных проб для внесения соответствующих поправок в результаты (см. 7.4.3-7.4.9).

3.5 Одной серии испытаний, в которой были параллельно использованы не менее трех образов ткани, должно быть достаточно для оценки исследуемой химической продукции, если при этом обеспечивается ее однозначная классификация. В случае получения сомнительных результатов, таких как несогласованность результатов параллельных определений, и/или в случае если среднее арифметическое значение показателя жизнеспособности составляет (50±5)%, может быть принято решение о проведении второй серии испытаний, а также третьей - в случае расхождения результатов в первой и второй сериях.