ГОСТ 34638-2020 Методы испытаний по воздействию химической продукции на организм человека. Разъедание кожи in vitro. Метод мембранного барьера

Введение

Разъедание кожи согласно определению, приведенному в Согласованной на глобальном уровне системе классификации и маркировки химической продукции Организации Объединенных Наций (СГС ООН) [1], представляет собой необратимое повреждение кожи, которое проявляется видимым некрозом эпидермиса и дермы, после нанесения на кожу исследуемой химической продукции. Обновленная редакция Руководства по проведению испытаний N 435 (OECD 435), на основе которой подготовлен настоящий стандарт, устанавливает метод in vitro, позволяющий определить наличие или отсутствие разъедающего действия химической продукции на основе ее способности проникать сквозь мембранный барьер. Метод предусматривает использование искусственной мембраны, характеристики которой выбраны таким образом, чтобы последствия воздействия на мембрану разъедающей продукции были аналогичны последствиям ее воздействия на кожу животных в естественных условиях (in situ).

Определение разъедающего действия на кожу традиционно осуществляется путем нанесения исследуемой химической продукции на кожу живых животных и оценки степени повреждения тканей по истечении заданного периода времени [2]. Помимо метода испытаний, установленного в OECD 435, приняты также другие методы испытаний in vitro [3], [4], которые могут рассматриваться как альтернатива стандартному методу испытаний in vivo на коже кролика (OECD 404) для выявления разъедающих свойств химической продукции [2]. Многоуровневой стратегией СГС ООН в области испытаний и оценки, посвященной тестированию и классификации разъедающего воздействия на кожу, а также Руководящим документом OECD по интегрированным подходам к испытаниям и оценке (Integrated Approaches to Testing and Assessment (IATA)) рекомендовано применение валидированных и одобренных методов испытаний in vitro согласно модулям 3 и 4 [1], [5]. IATA включает в себя несколько модулей, в которых сгруппированы разнообразные источники информации и методы испытаний, и содержит необходимые указания, касающиеся: (1) обобщения и использования имеющихся данных, полученных в ходе испытаний или иным путем для оценки способности химической продукции вызывать раздражение и разъедание кожи, а также (2) выбора оптимального подхода при возникновении потребности в дополнительных испытаниях, в том числе при получении отрицательных результатов [5]. В соответствии с данным модульным подходом положительные результаты, полученные с применением методов испытаний in vitro, могут быть использованы для классификации химической продукции по способности вызывать разъедание кожи без проведения испытаний на подопытных животных, причиняя последним вероятные в таких обстоятельствах боль и страдания.

Исследования с целью валидации метода мембранного барьера in vitro, известного на рынке как Corrositex [6]-[8], завершились успешно, продемонстрировав результирующую точность прогнозирования разъедания кожи на уровне 79% (128/163), чувствительность - на уровне 85% (76/89) и специфичность - на уровне 70% (52/74) для базы данных, включающей 163 наименования веществ и смесей [7]. После получения надлежащего признания данный валидированный референтный метод (ВРМ) (validated reference test method) был рекомендован к использованию в рамках многоуровневой стратегии испытаний для оценки потенциальной опасности химической продукции вызывать разъедание кожи [5], [7]. До начала применения какого-либо подобного метода мембранного барьера in vitro в сфере государственного регулирования необходимо убедиться, что его надежность, релевантность (точность), а также ограничения, которые касаются условий его предполагаемого применения, аналогичны показателям ВРМ [9], исходя из требований ранее установленных стандартов эффективности (СЭ) [10]. Присоединение к системе взаимного признания данных гарантируется только при условии, что предлагаемый новый или усовершенствованный метод испытаний, удовлетворяющий требованиям СЭ для ВРМ, одобрен и включен в OECD 435.

До настоящего времени единственным таким методом испытаний in vitro, отраженным в настоящем стандарте, является коммерчески доступный метод Corrositex.

Другие известные методы испытаний на разъедание кожи предусматривают использование реконструированного человеческого эпидермиса (OECD 431) [3] или образцов кожи крысы (OECD 430) [4].