ГОСТ 34638-2020

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

Методы испытаний по воздействию химической продукции на организм человека

РАЗЪЕДАНИЕ КОЖИ IN VITRO

Метод мембранного барьера

Methods for studying the effects of chemicals on the human body. In vitro skin damage. Membrane barrier method

МКС 71.040.10; 13.020.01

Дата введения 2021-07-01

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены".

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Республиканским унитарным предприятием "Белорусский государственный институт метрологии" (БелГИМ) на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии документа, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Государственным комитетом по стандартизации Республики Беларусь

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 января 2020 г. N 126-П)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 18 мая 2021 г. N 378-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 34638-2020 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2021 г.

5 Настоящий стандарт является модифицированным по отношению к международному документу OECD 435:2015* "Руководство по тестированию химической продукции. Метод определения мембранного барьера. Разъедание кожи in vitro" ("Guideline for the testing of chemicals. In Vitro Membrane Barrier Test Method for Skin Corrosion", MOD) путем изменения его структуры для приведения в соответствие с правилами, установленными в ГОСТ 1.5 (подразделы 4.2 и 4.3).     

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

Международный документ разработан Организацией экономического сотрудничества и развития OECD (Organisation for Economic Cooperation and Development).

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного документа для увязки с наименованиями, принятыми в существующем комплексе межгосударственных стандартов.

Сопоставление структуры настоящего стандарта со структурой указанного международного документа приведено в дополнительном приложении ДА

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

Введение

Разъедание кожи согласно определению, приведенному в Согласованной на глобальном уровне системе классификации и маркировки химической продукции Организации Объединенных Наций (СГС ООН) [1], представляет собой необратимое повреждение кожи, которое проявляется видимым некрозом эпидермиса и дермы, после нанесения на кожу исследуемой химической продукции. Обновленная редакция Руководства по проведению испытаний N 435 (OECD 435), на основе которой подготовлен настоящий стандарт, устанавливает метод in vitro, позволяющий определить наличие или отсутствие разъедающего действия химической продукции на основе ее способности проникать сквозь мембранный барьер. Метод предусматривает использование искусственной мембраны, характеристики которой выбраны таким образом, чтобы последствия воздействия на мембрану разъедающей продукции были аналогичны последствиям ее воздействия на кожу животных в естественных условиях (in situ).

Определение разъедающего действия на кожу традиционно осуществляется путем нанесения исследуемой химической продукции на кожу живых животных и оценки степени повреждения тканей по истечении заданного периода времени [2]. Помимо метода испытаний, установленного в OECD 435, приняты также другие методы испытаний in vitro [3], [4], которые могут рассматриваться как альтернатива стандартному методу испытаний in vivo на коже кролика (OECD 404) для выявления разъедающих свойств химической продукции [2]. Многоуровневой стратегией СГС ООН в области испытаний и оценки, посвященной тестированию и классификации разъедающего воздействия на кожу, а также Руководящим документом OECD по интегрированным подходам к испытаниям и оценке (Integrated Approaches to Testing and Assessment (IATA)) рекомендовано применение валидированных и одобренных методов испытаний in vitro согласно модулям 3 и 4 [1], [5]. IATA включает в себя несколько модулей, в которых сгруппированы разнообразные источники информации и методы испытаний, и содержит необходимые указания, касающиеся: (1) обобщения и использования имеющихся данных, полученных в ходе испытаний или иным путем для оценки способности химической продукции вызывать раздражение и разъедание кожи, а также (2) выбора оптимального подхода при возникновении потребности в дополнительных испытаниях, в том числе при получении отрицательных результатов [5]. В соответствии с данным модульным подходом положительные результаты, полученные с применением методов испытаний in vitro, могут быть использованы для классификации химической продукции по способности вызывать разъедание кожи без проведения испытаний на подопытных животных, причиняя последним вероятные в таких обстоятельствах боль и страдания.

Исследования с целью валидации метода мембранного барьера in vitro, известного на рынке как Corrositex [6]-[8], завершились успешно, продемонстрировав результирующую точность прогнозирования разъедания кожи на уровне 79% (128/163), чувствительность - на уровне 85% (76/89) и специфичность - на уровне 70% (52/74) для базы данных, включающей 163 наименования веществ и смесей [7]. После получения надлежащего признания данный валидированный референтный метод (ВРМ) (validated reference test method) был рекомендован к использованию в рамках многоуровневой стратегии испытаний для оценки потенциальной опасности химической продукции вызывать разъедание кожи [5], [7]. До начала применения какого-либо подобного метода мембранного барьера in vitro в сфере государственного регулирования необходимо убедиться, что его надежность, релевантность (точность), а также ограничения, которые касаются условий его предполагаемого применения, аналогичны показателям ВРМ [9], исходя из требований ранее установленных стандартов эффективности (СЭ) [10]. Присоединение к системе взаимного признания данных гарантируется только при условии, что предлагаемый новый или усовершенствованный метод испытаний, удовлетворяющий требованиям СЭ для ВРМ, одобрен и включен в OECD 435.

До настоящего времени единственным таким методом испытаний in vitro, отраженным в настоящем стандарте, является коммерчески доступный метод Corrositex.

Другие известные методы испытаний на разъедание кожи предусматривают использование реконструированного человеческого эпидермиса (OECD 431) [3] или образцов кожи крысы (OECD 430) [4].

     1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на метод испытаний с целью выявления химической продукции, обладающей разъедающим действием на кожу. Метод настоящего стандарта обеспечивает классификацию разъедающей химической продукции на три подкласса опасности, предусмотренные СГС ООН, а также для отнесения химической продукции в зависимости от опасности корродирующего воздействия к трем группам транспортной упаковки, установленным ООН.

     2 Термины, определения и сокращения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

2.1 вещество (substance): Химические элементы и их соединения, представленные в естественном состоянии или полученные при выполнении производственного процесса, включая любые добавки, необходимые для сохранения стабильности продукта, а также любые примеси, наличие которых обусловлено применяемым процессом, но исключая любые растворители, удаление которых не сказывается на стабильности вещества или на его составе.

2.2 исследуемая химическая продукция (test chemical): Продукция, которая подвергается испытаниям.

2.3 IATA (Integrated Approach on Testing and Assessment): Интегрированный подход к испытаниям и оценке.

2.4 многокомпонентное вещество (мulti-constituent substance): Вещество, характеризуемое количественным составом, в котором две или более основные структурные составляющие содержатся в количестве 10% (по массе), но <80% (по массе). Образование многокомпонентного вещества происходит в процессе производства. Различие между смесью и многокомпонентным веществом состоит в том, что смесь образуется путем соединения двух или более веществ при отсутствии химической реакции. Многокомпонентное вещество, напротив, образуется в результате химической реакции.

2.5 надежность (reliability): Показатель того, что метод испытаний может быть реализован с получением воспроизводимых результатов в рамках одной или различных лабораторий, в разное время при применении одного и того же протокола. Он оценивается путем вычисления внутри и межлабораторной воспроизводимости [9].

2.6 НР (NC - non corrosive): Неразъедающая.

2.7 однокомпонентное вещество (мono-constituent substance): Вещество, характеризуемое количественным составом, в котором одна основная структурная составляющая содержится в количестве не менее чем 80% (по массе).

2.8 разъедание кожи in vivo (skin corrosion in vivo): Возникновение необратимого повреждения кожи, которое проявляется видимым некрозом эпидермиса и дермы, возникающее после нанесения исследуемой химической продукции в срок до 4 ч. Разъедающее действие классифицируется по наличию язв, кровотечений, кровавых струпьев, а через 14 сут - по изменению оттенка кожи, вызванному ее обесцвечиванием, появлению участков выпадения волос (алопеции) и шрамов. В сомнительных случаях должно проводиться гистопатологическое исследование пораженных участков.

2.9 релевантность (relevance): Описание соответствия метода испытаний результату, полученному при исследованиях, а также его обоснованности и пригодности для определенных целей применения. Данная характеристика указывает пределы, в которых метод испытаний позволяет правильно измерить или спрогнозировать исследуемый биологический эффект. Релевантность включает рассмотрение точности (соответствия) метода испытаний [9].

2.10 СГС (Согласованная на глобальном уровне система классификации и маркировки химической продукции) (GHS (Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals)): Система, предусматривающая классификацию химической продукции (веществ и смесей) в зависимости от характерных видов и уровней физической опасности, опасности для здоровья человека или опасности для окружающей среды, с применением соответствующих средств информирования, таких как пиктограммы, сигнальные слова, краткая характеристика опасности, меры по предупреждению опасности и паспорта безопасности, чтобы обеспечить информацией о ее негативном воздействии с целью защиты людей (в том числе сотрудников, работников, перевозчиков, потребителей и представителей аварийных служб) и окружающей среды [1].

2.11 система обнаружения химической продукции (Chemical Detection System, CDS): Визуальная или электронная измерительная система, в которой используется индикаторный раствор, формирующая отклик на присутствие исследуемой химической продукции, который проявляется, например, в изменении цвета красителя или смеси красителей индикатора при изменении значения pH в случае присутствия исследуемой химической продукции либо иного рода химических или электрохимических реакций.

2.12 смесь (mixture): Смесь или раствор, состоящие из двух или более веществ, в которых они не вступают в реакцию друг с другом.

2.13 согласованность (concordance): Показатель эффективности метода испытаний, применимый к тем методам, которые позволяют получить однозначные результаты, и являющийся одним из аспектов релевантности. Данный термин, иногда применяемый взамен термина "точность", обозначает долю химической продукции, достоверно классифицированной как дающую при испытаниях положительный или отрицательный результат. Согласованность в значительной степени зависит от преобладания среди исследуемой химической продукции таких видов продукции, которая при испытании дает положительный результат [9].

2.14 специфичность (specificity): Доля всей дающей отрицательный результат/неактивной химической продукции, которая была правильно классифицирована с применением соответствующего метода испытаний. Этот показатель является мерой точности для метода испытаний, позволяющего получать однозначные результаты, и служит важной отправной точкой при оценке релевантности такого метода [9].

2.15 стандарты эффективности; СЭ (performance standards (PS)): Стандарты, основанные на применении валидированного метода испытаний и служащие для сравнительной оценки других предлагаемых методов испытаний, подобных ему с механистической и функциональной точки зрения. Стандарты устанавливают: (1) важнейшие составляющие метода испытаний, (2) минимальный перечень стандартных химических веществ, отобранных из числа веществ, которые применялись для подтверждения пригодности валидированного метода испытаний, а также (3) аналогичные уровни надежности и точности по результатам использования валидированного метода испытаний, которые предлагаемый метод испытаний должен демонстрировать при его оценке с использованием этого минимального перечня стандартных химических веществ [9].

2.16 точность (accuracy): Близость результата испытаний, полученного с применением соответствующего метода испытаний, к принятому эталонному значению величины. Точность является показателем эффективности метода и одним из аспектов релевантности. Данный термин часто применяется как взаимозаменяемый термину "согласованность" (concordance) для указания доли корректных результатов, полученных с применением соответствующего метода испытаний [9].

2.17 химическая продукция (chemical): Вещество или смесь веществ.

2.18 чувствительность (sensitivity): Доля всей дающей положительный результат/активной химической продукции, которая была правильно классифицирована с применением соответствующего метода испытаний. Этот показатель является мерой точности для методов испытаний, позволяющих получать однозначные результаты, и служит важной отправной точкой при оценке релевантности таких методов [9].

2.19 UVCB (unknown, of variable composition, or of biological origin): Вещества неизвестного или переменного состава, продукты комплексных реакций или вещества биологического происхождения.

     3 Исходные положения и ограничения

3.1 Метод испытаний, установленный в настоящем стандарте, позволяет идентифицировать исследуемую химическую продукцию как разъедающую кожу и обеспечивает возможность классификации такой разъедающей продукции на подклассы опасности в соответствии с требованиями СГС ООН (таблица 1) [1]. Кроме того, в отдельных случаях применение данного метода может быть оправданным для принятия решения о наличии или отсутствии коррозионных свойств у химической продукции конкретных классов, например органических и неорганических кислот, кислотных производных, а также оснований для целей правильного их транспортирования [7], [11], [12]. В настоящем стандарте описан базовый метод, аналогичный ВРМ [7]. Поскольку настоящий стандарт не содержит необходимой информации для определения раздражающего действия на кожу с точки зрения его влияния на здоровье человека, на исследования такого воздействия на кожу in vitro распространяется отдельное руководство OECD 439 [13]. Полная информация по оценке местного однократного воздействия химической продукции на кожу представлена в Руководящем документе по интегрированным подходам к испытаниям и оценке (IATA) N 203 [5].

________________