ГОСТ 32634-2020 Методы испытаний по воздействию химической продукции на организм человека. Разъедание кожи in vitro. Методы с использованием реконструированного человеческого эпидермиса

Введение

Разъедание кожи согласно определению, приведенному в Согласованной на Глобальном уровне системе классификации и маркировки химической продукции Организации Объединенных Наций (СГС ООН) [1], представляет собой необратимое повреждение кожи, которое проявляется видимым некрозом эпидермиса и дермы, после нанесения на кожу исследуемой химической продукции. Обновленная редакция Руководства по проведению испытаний N 431 (OECD 431), на основе которого подготовлен настоящий стандарт, устанавливает метод in vitro, позволяющий идентифицировать вещества и смеси, вызывающие или не вызывающие разъедание кожи, как это предусмотрено требованиями СГС ООН [1]. Данное Руководство обеспечивает возможность классификации продукции, обладающей разъедающим действием, на соответствующие подклассы опасности.

Оценка способности химической продукции вызывать разъедание кожи обычно предполагает использование лабораторных животных (Руководство OECD по проведению испытаний N 404 (OECD 404); впервые принято в 1981 г., пересмотрено в 1992, 2002 и 2015 гг.) [2]. В дополнение к методу OECD 431 валидированы и приняты также два других метода испытаний in vitro для определения разъедающего действия химической продукции, приведенных в OECD 430 [3] и OECD 435 [4] соответственно. Кроме того, OECD 439 [5] включает метод испытаний in vitro для определения способности химической продукции вызывать раздражение кожи. Специальный документ по интегрированным подходам к испытаниям и оценке (Integrated Approaches to Testing and Assessment - IATA), распространяющийся на оценку раздражающего и разъедающего действия на кожу, включает в себя несколько модулей, в пределах которых сгруппированы применяемые источники информации и методы исследований, и содержит необходимые указания, касающиеся: (i) обобщения и использования имеющихся данных, полученных в ходе испытаний или иным путем для оценки способности химической продукции вызывать раздражение и разъедание кожи, а также (ii) выбора оптимального подхода при возникновении потребности в дополнительных испытаниях [6].

Документ OECD 431 был впервые принят в 2004 г., а затем дважды подвергался изменениям: в 2013 г., когда в него были включены дополнительные методы испытаний на реконструированном человеческом эпидермисе (RhE) с возможностью применения таких методов для классификации разъедающей химической продукции с разделением на подклассы опасности, и в 2015 г., когда он был приведен в соответствие с положениями руководящего документа IATA и дополнен описанием альтернативного метода измерений жизнеспособности клетки.

В OECD 431 приведены четыре валидированных метода испытаний, каждый из которых основан на использовании серийно выпускаемых образцов RhE. Исследования на этапе предварительной валидации [7], а также последующие валидационные исследования [8]-[10] были проведены в отношении следующих двух методов, представленных на рынке [11], [12]: EpiSkin Standard Model (SM) и EpiDerm Skin Corrosivity Test (SCT) (EPI-200) (валидированные референтные методы (ВРМ)). По итогам исследований были подготовлены рекомендации, в соответствии с которыми применение упомянутых выше ВРМ в сфере государственного регулирования допускается для различения разъедающих (Р) и неразъедающих (НР) веществ, а EpiSkin также может использоваться для определения принадлежности разъедающих веществ к установленным для них подклассам опасности [13]-[15]. Как было определено в ходе валидации на основе принятых стандартов эффективности, два других доступных на рынке метода испытаний на разъедание кожи in vitro с использованием модели RhE обеспечивают получение результатов, которые аналогичны получаемым при помощи BPM EpiDerm [16]-[18]. Данные методы, SkinEthic RHE) и epiCS (ранее известный как EST-1000), также могут применяться в сфере государственного регулирования для различения разъедающих и неразъедающих веществ [19], [20]. Исследования, проведенные после валидации изготовителями моделей RhE в период с 2012 по 2014 гг. с использованием доработанного протокола для учета мешающих воздействий, возникающих при неспецифическом восстановлении MTT исследуемой химической продукцией, позволили не только повысить результативность различения P/HP-веществ, но и оптимизировать процесс определения их принадлежности к установленным подклассам опасности [21], [22]. Последующий статистический анализ данных, полученных для EpiDerm SCT, SkinEthic RHE и EpiCS после валидации, был направлен на выявление альтернативных моделей прогнозирования, повышающих вероятность построения достоверных прогнозов в части разделения продукции на подклассы опасности [23].

________________

Сокращение RhE (Reconstructed human Epidermis - реконструированный человеческий эпидермис) применяется для обозначения всех моделей, реализуемых на основе технологий RhE. Сокращение RHE в обозначении модели SkinEthic имеет аналогичную расшифровку, однако как часть торгового наименования для соответствующего метода испытаний оно записывается целиком заглавными буквами.

До начала применения в сфере государственного регулирования какого-либо предлагаемого подобного или модифицированного метода испытаний на разъедание кожи in vitro на модели RhE, отличного от ВРМ, необходимо убедиться, что его надежность, релевантность (точность), а также ограничения, которые касаются условий его предполагаемого применения, сопоставимы с аналогичными показателями ВРМ, исходя из требований стандартов эффективности (СЭ) [24], разработанных с учетом принципов Руководящего документа N 34 [25]. Присоединение к системе взаимного признания данных гарантируется только при условии, что предлагаемый новый или усовершенствованный метод испытаний, отвечающий требованиям СЭ, успешно прошел рассмотрение и его описание было включено в OECD 431. Методы, включенные в OECD 431, могут использоваться для приведения в соответствие требований к результатам испытаний на разъедание кожи in vitro, одновременно обеспечивая признание на взаимной основе результатов, полученных с использованием этих методов.