ГОСТ Р 59296-2021 Мука кормовая животного происхождения для производства кормов для непродуктивных животных. Технические условия

     Приложение Б
     (обязательное)

Определение содержания гистамина в кормовой муке животного происхождения для производства кормов для непродуктивных животных

Б.1 Сущность метода

Метод основан на экстракции гистамина разбавленным раствором хлорной кислоты, последующем центрифугировании и количественном определении методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с постколоночной дериватизацией о-фталальдегидом и флуориметрическим детектированием полученной производной.

Б.2 Требования к условиям измерений

При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия эксплуатации анализатора:

- температура окружающего воздуха от 18°С до 25°С;

- относительная влажность воздуха не менее 15% и не более 70% при температуре 25°С, с линейным снижением до 50% при температуре 40°С, без конденсации;

- атмосферное давление от 94,0 до 106,7 кПа (от 700 до 800 мм рт.ст.).

Б.3 Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы

Хроматограф жидкостный высокоэффективный*, включающий:

________________

* Примером хроматографической системы, соответствующей описанным требованиям, может служить хроматограф Waters модели 2695 Alliance со сканирующим флуориметрическим детектором Waters модели 2475 и хроматографической колонкой Waters Sunfire C18 размером 4,6х150 мм, под управлением программного обеспечения для сбора и обработки данных Empower 2.

- насос градиентный для 2-компонентного (или более) градиента со встроенным дегазатором, предназначенный для подачи подвижной фазы со скоростью 1 см/мин, предпочтительно оснащенный функцией автоматической промывки уплотнений;

- автосамплер, позволяющий дозировать пробу объемом 10 мкл, оснащенный термостатом, способным поддерживать температуру 15°С;

- колонку длиной 150 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, с обращенной фазой С18 размером частиц 5,0 мкм;

- термостат колонок, обеспечивающий поддержание температуры 30°C с точностью ±0,1°;

- детектор флуориметрический, позволяющий производить измерение при длине волны возбуждения 340 нм и длине волны эмиссии 445 нм;

- комплекс программно-аппаратный сбора и обработки данных.

Система постколоночной дериватизации**, состоящая из следующего оборудования:

________________

** Допускается использование специализированного оборудования для постколоночной дериватизации, например: системы постколоночной дериватизации Waters, состоящей из модуля постколоночной дериватизации (Post-Column Reaction Module), модуля контроля температуры (Temperature Control Module II) и насоса для подачи дериватизирующего раствора (Reagent Manager).

- насоса изократического, предназначенного для подачи дериватизирующего раствора со скоростью 0,6 см/мин, предпочтительно оснащенного функцией автоматической промывки уплотнений;

- реактора для проведения дериватизации, представляющего собой капилляр из PEEK (полиэфирэфиркетон) пластика с внешним диаметром 1/16 дюйма, внутренним диаметром 0,18 мм, длиной 1,5 м и Т-образный соединитель из PEEK (полиэфирэфиркетон) пластика для капилляров 1/16 дюйма.

Весы лабораторные специального класса точности (I) по ГОСТ Р 53228 с наибольшим пределом взвешивания 220 г, ценой деления 0,1 мг и пределом допускаемой абсолютной погрешности не более ±0,15 мг при нагрузке не более 50 г и не более ±0,3 мг при нагрузке свыше 50 г.

Весы лабораторные высокого класса точности (II) по ГОСТ Р 53228 с наибольшим пределом взвешивания 3000 г, ценой деления 0,01 г и пределом допускаемой абсолютной погрешности не более ±0,05 г.

Дозаторы пипеточные одноканальные с объемом дозирования от 20 до 200 мкл и пределом допускаемого относительного отклонения среднего арифметического значения фактического объема дозы от номинального ±(1,5...2,0)%; с объемом дозирования от 100 до 1000 мкл и пределом допускаемого относительного отклонения среднего арифметического значения фактического объема дозы от номинального ±1,0%; с объемом дозирования от 1000 до 5000 мкл и пределом допускаемого относительного отклонения среднего арифметического значения фактического объема дозы от номинального ±1,0%.

Дозатор бутылочный с объемом дозирования от 5 до 50 см и пределом допускаемой относительной погрешности дозирования ±1,0%.