ГОСТ 34597-2019 Анодные заземления установок электрохимической защиты от коррозии подземных металлических сооружений. Методы определения биокоррозионной агрессивности грунтов и их влияния на подземные металлические сооружения
Приложение В
(справочное)
Приготовление питательных сред
В.1 Общие требования
Для приготовления питательных сред применяют химически чистые реактивы. Реактивы взвешивают с погрешностью, не превышающей ±0,01 г
Все работы с питательными средами проводят с соблюдением правил стерильности над пламенем газовой горелки.
В.2 Приготовление среды Постгейта В для выращивания сульфатредуцирующих бактерий
В.2.1. Приготовление основного раствора среды Постгейта В
В состав основной среды Постгейта В входят следующие реактивы:
калий фосфорнокислый однозамещенный ( | 0,5 г |
аммоний хлористый ( | 1,0 г |
кальций сернокислый 2-водный ( | 1,0 г |
магний сернокислый 7-водный ( | 2,0 г |
кальций молочнокислый 5-водный ( | 3,5 г |
водопроводная вода | 988 см |
)
)
)
)
)Допускается замена кальция молочнокислого на натрий молочнокислый (3,5 г).
В.2.2. Приготовление добавок
Добавки к основной среде Постгейта В готовят каждую отдельно. В стерильный основной раствор перед посевом вносят добавки (на 1 дм среды):
- дрожжевой экстракт: готовят в виде 10%-го раствора и добавляют 10 см (массовая концентрация компонента в приготовленной среде 1 г/дм
);
- железо сернокислое закисное 7-водное (
): готовят в виде 5%-ного раствора в 1-2%-ном растворе соляной или серной кислоты и добавляют 10 см (массовая концентрация компонента в приготовленной среде 0,5 г/дм
);
- натрий углекислый кислый (
) готовят в виде 10%-ного водного раствора, который используют для установления рН среды в интервале от 7,2 до 7,5.
Раствор натрия сульфида готовят следующим образом: 1%-ный раствор сульфида натрия в 1%-ном растворе натрия углекислого кислого разливают в стеклянные ампулы объемом 2 см, ампулы запаивают и стерилизуют автоклавированием при давлении 0,5 атм и температуре 112,5°С в течение 20 мин. Перед посевом ампулы вскрывают и приливают 1-2 см
раствора в основную среду до появления темно-серой окраски среды.
В.3 Приготовление среды Бейеринка для культивирования тионовых бактерий
В состав среды Бейеринка входят следующие реактивы:
натрий серноватистокислый 5-водный ( | 5,0 г |
хлористый аммоний ( | 0,1 г |
натрий углекислый кислый ( | 1,0 г |
натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный ( | 0,2 г |
хлористый магний 6-водный ( | 0,1 г |
железо сернокислое закисное 7-водное ( | 0,005 г |
водопроводная вода | 1000 см |
)
)
)
)
)
)Значение рН готовой среды устанавливают при помощи концентрированной серной кислоты в пределах 7,0-7,2.
Натрий серноватистокислый и натрий углекислый кислый готовят и стерилизуют отдельно.
Натрий серноватистокислый готовят в виде 50%-ного водного раствора и вносят в стерильную среду 10 см (массовая концентрация компонента в приготовленной среде 5 г/дм
).
Натрий углекислый кислый готовят в виде 10%-ного раствора и вносят в стерильную среду 10 см (массовая концентрация компонента в приготовленной среде 1 г/дм
).
В.4 Стерилизация посуды и питательных сред