ГОСТ ISO/TR 10993-33-2018 Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 33. Руководство по испытаниям на генотоксичность. Дополнение к ISO 10993-3 (Переиздание)

     6.3.2 Исследуемые концентрации

Значения максимальных исследуемых концентраций будут зависеть от растворимости и цитотоксичности исследуемого соединения или цитотоксичности экстракта исследуемого образца.

Выбор диапазона доз

Выбор диапазона доз может быть сделан до проведения основного исследования, если ожидается значительная цитотоксичность исследуемого образца, например цитотоксичность или подавление роста выше 50%. Цитотоксичность может проявляться сокращением количества колоний ревертантов, подавлением или уменьшением роста клеток или снижением жизнеспособности культур. Цитотоксичность исследуемого образца может быть изменена в присутствии систем метаболической активации. Нерастворимость должна быть оценена как преципитация в конечной смеси при реальных условиях исследования и очевидна невооруженному глазу.

Исследование предельных доз

Для растворимых нецитотоксичных тестируемых компонентов (определенных в исследовании DRF) приемлемо единственное измерение при одной дозе, составляющей по меньшей мере 5 мг/чашка, или 5 мкл/чашка (см. приложение А, метод А или, если выполнимо, метод В ISO 10993-3), или 0,1 мл 100%-ного (чистого) экстракта исследуемого образца (см. приложение А, метод С ISO 10993-3). Для исследуемых образцов, приготовленных следуя руководству, предоставленному в ISO 10993-12, в большинстве ситуаций исследование наивысшей дозы с использованием 100%-ного экстракта исследуемого образца является приемлемым и исследование других доз необязательным.

Исследование основной дозы

Если исследуемый образец демонстрирует видимые признаки преципитации или уже является цитотоксичным ниже уровня дозы 5 мг/чашку?* или 5 мкл/чашку*, или 100%-ного экстракта исследуемого образца, необходимо проводить полное исследование по меньшей мере с пятью разными концентрациями исследуемого образца. Для цитотоксичных соединений/экстрактов исследуемого образца уровни доз для ревертантной частоты должны покрывать диапазон от максимальной до небольшой цитотоксичности или ее отсутствия. Для нецитотоксичных веществ, которые не растворимы при 5 мг/чашку или 5 мкл/чашку*, одна или более из исследуемых концентраций должны быть нерастворимыми при окончательном тестировании. Преципитат не должен мешать подсчету.

___________________

* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

При определении наибольшего количества исследуемого образца следует учитывать такие критерии, как цитотоксичность и растворимость смеси на завершающей стадии обработки. Полезно определить токсичность и нерастворимость в предварительном исследовании. Цитотоксичность может проявляться сокращением количества колоний ревертантов, подавлением или уменьшением фонового роста клеток или снижением жизнеспособности культур. Цитотоксичность исследуемого образца может быть изменена в присутствии системы метаболической активации. Нерастворимость должна быть оценена как преципитация конечной смеси при реальных условиях исследования и очевидна невооруженному глазу. Рекомендуемая максимальная исследуемая концентрация будет зависеть от выбранного метода приготовления исследуемого образца:

a) для растворимых нецитотоксичных исследуемых образцов (см. приложение А, метод А, ISO 10993-3) рекомендуемая максимальная исследуемая концентрация составляет 5 мг/чашку* или 5 мкл/чашку*. Для нецитотоксичных исследуемых образцов, которые не растворимы при 5 мг/чашку* или 5 мкл/чашку* (в случае жидких химических веществ), одна или более из исследуемых концентраций окончательного образца должны быть нерастворимыми. Исследуемые образцы, являющиеся цитотоксичными в дозах менее 5 мг/чашку* или 5 мкл/чашку* (в случае жидких химических веществ), следует тестировать в концентрациях ниже цитотоксичной. Преципитат не должен мешать подсчету;

___________________

* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.     

b) для тестируемых образцов в соответствии с приложением А, метод В, ISO 10993-3 рекомендуемая максимальная исследуемая концентрация составляет 5 мг/чашку*, если это выполнимо. Для нецитотоксичных тестируемых образцов, которые не растворимы при концентрации 5 мг/чашку, одна или более из исследуемых концентраций должны быть нерастворимыми в окончательном образце. Преципитат не должен мешать подсчету. Тестируемые образцы, являющиеся цитотоксичными ниже уровня дозы 5 мг/чашку*, должны исследоваться в концентрациях ниже цитотоксичной;

___________________

* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.          

c) для тестируемых образцов в соответствии с приложением А, метод С, ISO 10993-3 рекомендуемой максимальной исследуемой концентрацией является 100%-ный экстракт исследуемого образца.