ГОСТ ISO 16000-20-2017 Воздух замкнутых помещений. Часть 20. Обнаружение и подсчет плесневых грибков. Определение общего количества спор

     6 Методика измерения

6.1 Отбор проб

Отбор проб обычно проводят на высоте от 0,75 до 1,5 м от пола. В особых случаях допустимо проводить отбор проб на другой высоте. Следят за тем, чтобы пыль, осевшая на пол в доме, не попала в устройство отбора проб при его размещении на небольшой высоте от пола.

В соответствии с задачей и методикой измерения подготавливают необходимое количество импакторов и подложек или кассет.

Примечание - Если невозможно предсказать содержание спор, то может быть отобрано несколько проб (например, 50 дм, 100 дм и 200 дм) и для подсчета может быть использована наиболее подходящая проба (содержащая достаточное количество спор и не перегруженная).

Проверяют оборудование на комплектность и функциональность с поверочным листом. Через регулярные интервалы проводят оперативный контроль. Оперативный контроль подразумевает, в первую очередь, контроль объемного расхода.

Для каждой точки измерения используют стерильные устройства, содержащие предметные стекла или кассеты. В качестве альтернативы очищают щель этанолом или изопропанолом (70 об. %) и затем высушивают (например, сжатым воздухом).

Помещают предметные стекла или кассеты в импакторы. Избегают загрязнения устройства отбора проб.

Включают пробоотборник в соответствии с инструкцией по эксплуатации. Рекомендуется проводить несколько измерений, отбирая пробы разного объема. Это особенно важно, если ожидаемый уровень содержания плесневых грибков неизвестен.

По завершении отбора проб удаляют предметные стекла или кассеты из устройства отбора проб и запаковывают их в стерильные контейнеры и/или пластиковые пакеты для предотвращения какого-либо вторичного загрязнения. В дальнейшем на новой точке измерения перед проведением отбора проб с импактором, содержащим предметное стекло, воздух в течение нескольких минут прокачивают через импактор без предметного стекла.

Для одноразовых пробоотборников следуют инструкции по эксплуатации.

Заполняют протокол отбора проб (см. раздел 11* и приложение В).

________________

* Вероятно, ошибка оригинала. Следует читать: раздел 9. - Примечание изготовителя базы данных.

Транспортируют пробы в лабораторию (см. 6.4) и проводят анализ методом прямой микроскопии (см. 6.2).

6.2 Прямая микроскопия

Споры на липкой поверхности окрашивают раствором лактофенола синего (см. 5.2) или хлопкового голубого в молочной кислоте и оценивают под микроскопом при 400- или 1000-кратном увеличении.

Примечание - Для того, чтобы получить представление о спорах в пробе, первоначально можно провести осмотр при 100- или 200-кратном увеличении.

Если были отобраны пробы разных размеров, то для подсчета выбирают наиболее подходящую пробу (содержащую достаточное количество спор и не перегруженную).

Примечания

1 Подсчет спор различных типов под микроскопом является сложным процессом, который проводится только квалифицированным и хорошо обученным персоналом.

2 Раствор лактофенола синего является токсичным и, по возможности, следует избегать работы с ним. Также следует предусмотреть окрашивание спор подходящим альтернативным красителем. Следует обратить внимание, что хлопковый голубой в молочной кислоте не работает с PS 30 и MBASS30, которые используются для определения рабочих характеристик (см. раздел 10).

При использовании метода отбора проб с применением щелевых импакторов на предметном стекле образуется след (трек) пробы длиной приблизительно 1,6 см и шириной приблизительно 1 мм, который также оценивают с помощью микроскопии.

Как правило, предметное стекло оценивают на наличие следующих типов спор: базидиоспоры, аскоспоры, Cladosporium, споры типа Aspergillus/Penicillium, Stachybotrys, Chaetomium, споры типа Alternaria/Ulocladium, споры типа Helminthosporium, Epicoccum, других спор и фрагментов мицелия. Дополнительные типы спор, которые встречаются в нетипичных концентрациях и могут быть отнесены к какому-либо морфологическому типу, также протоколируют.

Базидиоспоры, аскоспоры, споры типа Alternaria/Ulocladium, Helminthosporium, Epicoccum обычно образуются в источниках внутри помещения и, следовательно, их наличие дает представление о том, в какой степени проба находилась под воздействием наружного воздуха (например, из-за утечек вокруг оконного пространства, механического воздействия или занесения спор снаружи).

Крупные легко идентифицируемые споры, например споры Stachybotrys или Chaetomium, подсчитывают на всей поверхности в продольном направлении следа пробы при 400-кратном увеличении. Таким образом, полностью загруженная поверхность импактора может быть оценена за короткий промежуток времени, и при этом определено число спор на единицу объема пробы. Теоретический предел обнаружения составляет одну спору на отобранный объем пробы.

Для небольших спор, например типа Aspergillus/Penicillium, проводят дополнительную более детальную оценку при 1000-кратном увеличении в направлении, перпендикулярном направлению следа пробы. Детальная оценка требует больших затрат времени, и поэтому может быть исследована только небольшая часть пробы (обычно от 10 до 30% общей поверхности импактора, см. раздел 10). Следовательно, предел обнаружения для небольших спор выше, чем для крупных спор. Для пробы объемом 200 дм и при оценке 10 поперечных пересечений теоретический предел обнаружения составляет приблизительно 50 спор/м (1 спора присутствует в 10 пересечениях).

Для количественной оценки предпочтительно, чтобы в оцениваемом обзорном поле микроскопа присутствовало 10 или более спор.

Примечание - Такие частицы, как чешуйки кожи и другие (минеральные и органические) частицы, не учитывают, но они могут быть указаны в других категориях и определено их содержание, чтобы иметь представление о влиянии соответствующих видов деятельности в помещении.