ГОСТ ISO/TS 13136-2016 Микробиология пищевой продукции и кормов для животных. Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени для определения патогенных микроорганизмов. Горизонтальный метод определения бактерий Escherichia coli, продуцирующих Шига-токсин, в том числе серогрупп O157, O111, O26, O103 и O145 (с Поправкой)

     5 Разбавители, питательные среды и реактивы

В ходе проведения анализа, если не указано иное, используют реактивы только признанной аналитической степени чистоты и стерильную, дистиллированную, деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.

5.1 Питательные среды

5.1.1 Модифицированный триптон-соевый бульон (mTSB)

5.1.1.1 Базовый состав и рН среды

Ферментативный перевар казеина - 17 г;

Ферментативный перевар сои - 3 г;

D(+)-глюкоза - 2,5 г;

Натрия хлорид - 5 г;

Калий фосфорнокислый двухзамещенный () - 4 г;

Соли желчных кислот N 3 - 1,5 г;

Дистиллированная вода - до 1000 см;

рН (7,4±0,2) ед. рН.

Процедура приготовления среды следующая: компоненты сухой питательной среды растворяют в воде. Устанавливают рН на уровне (7,4±0,2) ед. рН при температуре 25°С и стерилизуют автоклавированием при температуре 121°С в течение 15 мин.

5.1.1.2 Раствор новобиоцина

Состав раствора:

Новобиоцин - 0,16 г;

Вода - 10 см.

Процедура приготовления раствора следующая: новобиоцин растворяют в воде и стерилизуют путем мембранной фильтрации с помощью фильтров с размерами пор 0,22 мкм или 0,45 мкм.

Раствор готовят в день его использования.

5.1.1.3 Раствор акрифлавина

Состав раствора:

Акрифлавин - 0,12 г;

Вода - 10 см.

Процедура приготовления раствора следующая: акрифлавин растворяют в воде и стерилизуют путем мембранной фильтрации с помощью фильтров с размерами пор 0,22 мкм или 0,45 мкм.

Раствор готовят в день его использования.

5.1.1.4 Приготовление готовой питательной среды

Непосредственно перед использованием 1 см раствора новобиоцина (см. 5.1.1.2) или раствора акрифлавина добавляют (см. 5.1.1.3) к 1000 см охлажденного бульона mTSB (см. 5.1.1.1).

Конечная концентрация новобиоцина в mTSB должна быть 16 мг/дм.