Предупреждение - Тетрахлорэтан - яд. Этидиум бромид - мутагенное вещество. В случае проливания необходимо немедленно принять меры по обезвреживанию. Приготовление и применение красящих растворов необходимо проводить в вытяжном шкафу, используя средства индивидуальной защиты.
4.1.1 Модифицированный окрашивающий раствор Newman-Lampert (модификация Lewowitz-Weber)
4.1.1.1 Состав
Этанол с объемной долей спирта 95%, см | 54,0 |
Тетрахлорэтан, см | 40,0 |
Метиленовый синий, г | 0,6 |
Ледяная уксусная кислота, см | 6,0 |
Примечание - Допускается применять ксилол в том же объеме, какой указан для тетрахлорэтана. |
4.1.1.2 Приготовление
В колбе смешивают этанол и тетрахлорэтан, укупоривают пробкой. Смесь нагревают на водяной бане (см. 5.1) до температуры 65°C. Добавляют метиленовый голубой в вытяжном шкафу и тщательно перемешивают. Раствор охлаждают в холодильнике до 4°C.
Затем добавляют ледяную уксусную кислоту и вновь тщательно перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр (см. 5.2) в герметичную колбу на хранение.
Перед использованием окрашивающий раствор Newman-Lampert снова фильтруют.
4.1.2 Окрашивающий раствор бромида этидия
4.1.2.1 Основной окрашивающий раствор
4.1.2.1.1 Состав
Бромид этидия, г | 0,25 |
Деминерализованная вода, см | 100 |
4.1.2.1.2 Приготовление основного окрашивающего раствора
Бромид этидия растворяют в деминерализованной воде, предварительно нагретой до 40°C. Охлаждают раствор до комнатной температуры. Доводят до 100 см деминерализованной водой.
Основной окрашивающий раствор бромида этидия хранят не более двух месяцев в темном месте при температуре (2±2)°C.
4.1.2.2 Буферный раствор
4.1.2.2.1 Состав
Гидрофталат калия, г | 0,51 |
Гидроксид калия, г | 0,162 |
Деминерализованная вода, см | 100 |
4.1.2.2.2 Приготовление буферного раствора
Гидрофталат калия и гидроксид калия растворяют раздельно в деминерализованной воде.
Буферный раствор хранят в темном месте при температуре (2±2)°C не более 2 мес.
4.1.2.3 Рабочий окрашивающий раствор бромида этидия