ГОСТ ISO 13366-1-2014

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

     

МОЛОКО

     
Подсчет соматических клеток

     
Часть 1

     
Метод с применением микроскопа (контрольный метод)

     
Milk. Enumeration of somatic cells. Part 1. Microscopic method (reference method)

МКС 67.100.10

Дата введения 2017-07-01

     

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Научно-производственным республиканским унитарным предприятием "Белорусский государственный институт стандартизации и сертификации" (БелГИСС) на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии международного стандарта, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Государственным комитетом по стандартизации Республики Беларусь

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 25 июня 2014 г. N 45-2014)

За принятие проголосовали:

(Поправка. ИУС N 7-2019).

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23 сентября 2016 г. N 1207-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 13366-1-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2017 г.

5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 13366-1:2008/IDF 148-1:2008* "Молоко. Подсчет соматических клеток. Часть 1. Метод с применением микроскопа (контрольный метод)" ("Milk - Enumeration of somatic cells - Part 1: Microscopic method (reference method)", IDT), включая техническую поправку к нему Cor.1:2009.

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

Международный стандарт ISO 13366-1:2008/IDF 148-1:2008 разработан подкомитетом SC 5 "Молоко и молочные продукты" Технического комитета по стандартизации ISO/TC 34 "Пищевые продукты" Международной организации по стандартизации (ISO) и Международной молочной федерацией (IDF).

Официальные экземпляры международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, и международных стандартов, на которые даны ссылки, имеются в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.

В тексте стандарта ссылки на международные стандарты актуализированы

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

ВНЕСЕНА поправка, опубликованная в ИУС N 7, 2019 год

Поправка внесена изготовителем базы данных

     1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод определения количества соматических клеток в сыром и химически консервированном молоке.

Метод применяется для подсчета соматических клеток в коровьем молоке, при условии, что обнаружены предпосылки их присутствия.

Стандарт допускается применять для подготовки стандартных проб при калибровке механизированных и автоматизированных способов подсчета клеток.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - При применении настоящего стандарта могут использоваться опасные вещества и оборудование. Настоящий стандарт не предусматривает рассмотрения всех проблем безопасности, связанных с его применением. Ответственность за соблюдение техники безопасности и охраны здоровья, а также установление соответствующих ограничений по применению настоящего стандарта несет пользователь.

     2 Термины и определения

В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:

2.1 соматические клетки (somatic cells): Клетки с ядрами, то есть все лейкоциты и эпителиальные клетки, определяемые в соответствии с методом, приведенным в настоящем стандарте.

     3 Сущность метода

Анализируемую пробу молока распределяют тонким слоем на предметном стекле, получая мазок. Мазок подсушивают и окрашивают, затем под микроскопом подсчитывают количество окрашенных клеток. Для определения количества клеток в 1 см пробы число клеток, подсчитанное на четко установленной площади, умножают на рабочий коэффициент.

     4 Реактивы

Используют реактивы только признанной аналитической чистоты, если нет других указаний, дистиллированную или деминерализованную воду или воду, эквивалентную по чистоте.

     4.1 Растворы красителей

Предупреждение - Тетрахлорэтан - яд. Этидиум бромид - мутагенное вещество. В случае проливания необходимо немедленно принять меры по обезвреживанию. Приготовление и применение красящих растворов необходимо проводить в вытяжном шкафу, используя средства индивидуальной защиты.

4.1.1 Модифицированный окрашивающий раствор Newman-Lampert (модификация Lewowitz-Weber)

4.1.1.1 Состав

4.1.1.2 Приготовление

В колбе смешивают этанол и тетрахлорэтан, укупоривают пробкой. Смесь нагревают на водяной бане (см. 5.1) до температуры 65°C. Добавляют метиленовый голубой в вытяжном шкафу и тщательно перемешивают. Раствор охлаждают в холодильнике до 4°C.

Затем добавляют ледяную уксусную кислоту и вновь тщательно перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр (см. 5.2) в герметичную колбу на хранение.

Перед использованием окрашивающий раствор Newman-Lampert снова фильтруют.

4.1.2 Окрашивающий раствор бромида этидия

4.1.2.1 Основной окрашивающий раствор

4.1.2.1.1 Состав

4.1.2.1.2 Приготовление основного окрашивающего раствора

Бромид этидия растворяют в деминерализованной воде, предварительно нагретой до 40°C. Охлаждают раствор до комнатной температуры. Доводят до 100 см деминерализованной водой.

Основной окрашивающий раствор бромида этидия хранят не более двух месяцев в темном месте при температуре (2±2)°C.

4.1.2.2 Буферный раствор

4.1.2.2.1 Состав

4.1.2.2.2 Приготовление буферного раствора

Гидрофталат калия и гидроксид калия растворяют раздельно в деминерализованной воде.

Буферный раствор хранят в темном месте при температуре (2±2)°C не более 2 мес.

4.1.2.3 Рабочий окрашивающий раствор бромида этидия

4.1.2.3.1 Компоненты

4.1.2.3.2 Приготовление рабочего окрашивающего раствора бромида этидия