ГОСТ ISO 3890-2-2013 Молоко и молочные продукты. Определение остаточного содержания хлорорганических соединений (пестицидов). Часть 2. Методы очистки экстракта и подтверждение

     6 Метод D. Колоночная хроматография на оксиде алюминия точно определенной активности

6.1 Сущность метода

(См. ссылку [7]).

Хлорорганические соединения экстрагируют из пробы, используя ацетон/н-гексан. Ацетон отделяют с водным сульфатом натрия; н-гексан осушают и концентрируют. Определенное количество экстракта жира очищают, используя хроматографию на оксиде алюминия точно определенной активности, применяя н-гексан в качестве элюирующего растворителя.

Элюат осушают, затем анализируют с помощью ГЖХ.

6.2 Реактивы

Применяют реактивы только установленной аналитической квалификации, если не установлено иное, а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.

6.2.1 Ацетон (CHCOCH)

6.2.2 н-гексан [CH(CH)CH].

6.2.3 Сульфат натрия (NaSO) гранулированный, безводный.

Нагревают при температуре 500°C в течение 4 ч, затем охлаждают и хранят в закрытом сосуде.

6.2.4 Раствор сульфата натрия, 2-процентный раствор.

6.2.5 Оксид алюминия (AlO), нейтральный (W 200), степень активности - Super 1 или эквивалентная.

_________________

W 200 - пример изделий, имеющихся в продаже. Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта.

Материал при получении предварительно прогревают при температуре (500±25)°C в течение 3-4 ч для удаления влаги и любых лишних органических веществ и охлаждают над пентоксидом фосфора. Дезактивируют порцию, добавляя примерно 10 см воды на 90 г оксида алюминия, порциями по 2 или 3 см, вращая при этом колбу или другую стеклянную посуду. Плотно закупоривают и встряхивают или помещают на вращающийся валик для тщательного перемешивания. Перед применением дают отстояться в течение 24 ч в закрытом сосуде и температуре окружающей среды. Материал проверяют следующим образом. Взвешивают 22,0 г оксида алюминия. Готовят суспензию в небольшом объеме н-гексана (6.2.2) и переносят ее в хроматографическую колонку (6.3.2). Добавляют слой 10 мм безводного сульфата натрия (6.2.3) и промывают колонку 15-20 см н-гексана. Устанавливают слой н-гексана немного ниже слоя сульфата натрия.

Помещают под колонку подходящий приемник (объемом не менее 250 см). В верхнюю часть колонки пипеткой вводят небольшой объем раствора н-гексана, содержащий 1 г масла или животного жира. Пипетка должна быть сухой, и масло не должно пройти в нижнюю часть колонки. Дают уровню масла в растворе н-гексана впитаться ниже верхней поверхности слоя сульфата натрия. Добавляют 2 см н-гексана и опять дают ему впитаться.

Элюируют колонку 150 см н-гексана. Выпаривают элюат до небольшого объема в испарителе (6.3.3) и переносят его в сосуд для взвешивания, предварительно прогретый до 110°C, охлажденный и взвешенный. Удаляют оставшийся растворитель нагревом под слабым потоком азота. Высушивают в печи при температуре 110°C в течение 5 мин. Охлаждают в эксикаторе и взвешивают с точностью до 0,01 г. Необходимо удостовериться, что масса жира стала постоянной. Допустим, масса жира равна m.

Отмеряют пипеткой такой же объем первоначального раствора н-гексана в другую предварительно взвешенную колбу, выпаривают, высушивают и взвешивают как описано раньше. Допустим, масса жира равна m.

Способность поглощения жира в колонке равна (m-m) г, вычисленная с точностью до 0,01 г. Активность оксида алюминия регулируют при необходимости в несколько этапов так, чтобы способность поглощения жира в колонке была равна (0,62±0,02) г животного или рафинированного растительного жира или (0,52±0,02) г молочного жира.

Для проведения ряда анализов определенного объема жира дезактивируют достаточное количество оксида алюминия (например, остающееся количество в стеклянной посуде вместимостью 500 г).

6.3 Оборудование

Применяется обычное лабораторное оборудование, а также указанное ниже.

6.3.1 Высокоскоростной смеситель.

6.3.2 Хроматографическая колонка внутренним диаметром 20 мм и длиной 300 мм с запорным краном из политетрафторэтилена (ПТФЭ).

6.3.3 Роторный испаритель (Kuderna-Danish или эквивалентный) с колбой вместимостью 500 сми прикрепленной градуированной пробиркой.

6.3.4 Вата, промытая петролейным эфиром.

6.4 Методика

6.4.1 Общие методы