4.1. РДП ставят в агаровом геле.
4.2. Компоненты реакции: специфическая преципитирующая сыворотка; контрольная отрицательная сыворотка; исследуемый материал от больных животных; специфический антиген.
4.3. Агаровую среду готовят по прописи: агар - 1,0, физиологический раствор рН 7,4 - 100,0 мл. Агар расплавляют на водяной бане и разливают в чашки Петри по 25 мл или на обезжиренные предметные стекла. В слое застывшего агара при помощи штампа нарезают лунки - одну центральную и 6 вокруг нее на расстоянии 0,5...0,7 см.
4.4. Постановка реакции. В центральную лунку вносят специфическую сыворотку, в лунки по окружности - испытуемый материал. Параллельно испытуемый материал исследуют с отрицательной сывороткой.
Контроли:
1) контрольный положительный антиген + специфическая сыворотка;
2) контрольный положительный антиген + отрицательная сыворотка.
Чашки Петри или предметные стекла помещают во влажную камеру, выдерживают при температуре 37°С в течение 18...24 ч и затем при комнатной температуре в течение такого же времени.
4.5. Учет реакции. Реакцию считают положительной при условии образования ясно выраженной линии преципитации между лунками с исследуемым антигеном и специфической сывороткой, а также между контрольным положительным антигеном и специфической сывороткой при отрицательном результате с отрицательной сывороткой.