ГОСТ 33463.6-2016 Системы жизнеобеспечения на железнодорожном подвижном составе. Часть 6. Методы гигиенической оценки системы водоснабжения (с Поправкой)

Приложение Г
(обязательное)

     
Постановка оксидазного теста

Г.1 Для подтверждения наличия в пробе воды колиформных бактерий выполняют оксидазный тест одним из следующих способов.

Г.1.1 Способ 1

В качестве реактива для оксидазного теста используют тетраметил-п-фенилендиамин гидрохлорид.

Мембранный фильтр с выросшими на нем колониями (см. 8.3) с питательной среды пинцетом переносят на диск фильтровальной бумаги немного большего диаметра, чем мембранный фильтр, обильно смоченный реактивом для определения оксидазной активности - тетраметил-п-фенилендиамин гидрохлоридом. Оксидазный тест считают положительным, если в течение 1-4 мин появляется окрашивание колоний фиолетово-коричневого цвета. В случае необходимости дальнейшей идентификации изолированных оксидазоотрицательных бактерий, пересев колоний на другие дифференциальные среды можно проводить непосредственно с мембранного фильтра. Время пересева не ограничено.

Г.1.2 Способ 2

В качестве реактива для оксидазного теста используют диметил-п-фенилендиамин с -нафтолом.

Мембранный фильтр с выросшими на нем колониями (см. 8.3) с питательной среды пинцетом переносят на кружок фильтровальной бумаги немного большего диаметра, чем мембранный фильтр, обильно смоченный реактивом диметил-п-фенилендиамином солянокислым для определения оксидазной активности. Оксидазный тест считают положительным, если появляется окрашивание колоний в синий цвет.

После появления первых признаков положительного теста, но не позднее, чем через 3-4 мин, мембранный фильтр переносят обратно на питательную среду. В случае необходимости дальнейшей идентификации оксидазоотрицательных бактерий пересев колоний на дифференциальные среды проводят непосредственно с мембранного фильтра, расположенного на питательной среде. Посев целесообразно проводить не сразу после определения оксидазной активности, а после выдерживания на питательной среде свыше 5 мин.

Г.1.3 Способ 3

Тест проводят с использованием готовых к употреблению дисков или полосок OXI-тест, разрешенных к применению в соответствии с 8.1.6, в соответствии с инструкциями по их применению, разработанными производителем.