ГОСТ 33780-2016 Продукты пищевые, корма, комбикорма. Определение содержания афлатоксина В1 методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением очистки на оксиде алюминия

     8 Подготовка к проведению испытаний

8.1 Подготовка стеклянной посуды

Посуду для приготовления и хранения подвижной фазы моют только серной кислотой по 6.15 без применения других моющих средств, тщательно промывают водопроводной водой и ополаскивают дистиллированной водой.

Остальную стеклянную посуду моют горячей водой с моющим средством, тщательно ополаскивают дистиллированной водой и сушат в сушильном шкафу при температуре 105°C.

8.2 Приготовление вспомогательных растворов

8.2.1 Приготовление подвижной фазы ацетонитрил-дистиллированная вода в объемном соотношении 23:77

В коническую или плоскодонную колбу вместимостью 500 см помещают 115 см ацетонитрила и 385 см дистиллированной воды. Смесь тщательно перемешивают.

При хранении подвижной фазы недопустимо использование резиновых и корковых пробок.

Срок хранения подвижной фазы при комнатной температуре в стеклянной емкости с пришлифованной стеклянной, фторопластовой или полиэтиленовой пробкой - не более 3 мес.

Перед использованием подвижную фазу дегазируют и фильтруют в соответствии с указаниями изготовителя хроматографа и(или) колонки.

Примечания

1 В зависимости от типа сорбента и типоразмера применяемых колонок допускается варьирование состава подвижной фазы в диапазоне объемной доли ацетонитрила от 20% до 25% с целью оптимизации отделения пика афлатоксина В от пиков компонентов матрицы пробы. Рекомендации по оптимизации состава подвижной фазы приведены в приложении Б.

2 При наличии технической возможности допускается использование градиентной техники элюирования. Состав подвижных фаз и программу элюирования оптимизируют в соответствии с рекомендациями изготовителя колонок. Например, для колонок по 6.3 рекомендуется следующий режим: объемная доля ацетонитрила, % (время, мин) - 15(0)-15(2)-40(19)-40(24).

8.2.2 Приготовление смеси ацетонитрила и дистиллированной воды в объемном соотношении 9:1

В плоскодонную или коническую колбу вместимостью 250 см помещают 180 см ацетонитрила и 20 см дистиллированной воды. Смесь тщательно перемешивают.

Срок хранения смеси при комнатной температуре в стеклянной емкости с пришлифованной стеклянной, фторопластовой или полиэтиленовой пробкой - 3 мес.

8.2.3 Приготовление раствора хлорида натрия с массовой концентрацией 40 г/дм

В мерную колбу вместимостью 100 см помещают 4,0 г хлорида натрия, добавляют 30-50 см дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения. Доводят объем дистиллированной водой до метки и снова перемешивают.

Срок хранения при комнатной температуре - 3 мес.

8.3 Приготовление растворов афлатоксина В

8.3.1 Общие положения

Растворы афлатоксина В должны храниться в темноте при температуре не выше 6°С в стеклянных сосудах с фторопластовыми или пришлифованными стеклянными пробками.

8.3.2 Приготовление исходного раствора афлатоксина В с номинальным значением массовой концентрации 50 нг/см

В мерную колбу вместимостью 100 см помещают пипеткой или дозатором 0,5 см стандартного образца состава раствора афлатоксина В номинального значения массовой концентрации 10 мкг/см(6.12) и доводят до метки ацетонитрилом (6.14).

Срок хранения исходного раствора в холодильнике при температуре от 2°С до 6°С - не более 6 мес. Рекомендуется использовать сосуды из темного стекла, а сосуды из бесцветного стекла заворачивать в материалы, не пропускающие свет (например, алюминиевую фольгу).

Фактическое значение массовой концентрации афлатоксина В в исходном растворе (, нг/см) вычисляют по формуле

,                                                          (1)

где - значение массовой концентрации афлатоксина В в стандартном образце, мкг/см;