ГОСТ EN 14148-2015 Продукция пищевая. Определение витамина K(1) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     4 Реактивы

4.1 Общие положения

Для проведения анализа, если не указано иное, используют только реактивы признанной аналитической чистоты и воду не ниже первой степени чистоты по EN ISO 3696 или дистиллированную воду.

4.2 Химические вещества и растворы

4.2.1 Метанол, массовая доля ()99,8%.

4.2.2 Этанол, объемная доля ()99,8%.

4.2.3 Смесь этанола и метанола, объемная доля ()=95%

Смешивают 950 см этанола (4.2.2) с 50 см метанола (4.2.1).

4.2.4 Дихлорметан, массовая доля ()99,5%.

4.2.5 Н-гексан, массовая доля ()97%.

4.2.6 Петролейный эфир, с диапазоном температуры кипения 35-60°С, ч.д.а.

4.2.7 Гидроксид калия, массовая доля (KOH)85%.

4.2.8 Раствор гидроксида калия молярной концентрации (КОН)=10 моль/дм.

4.2.9 Калий фосфорнокислый однозамещенный, массовая доля ()99,5%.

4.2.10 Карбонат калия, массовая доля ()99,9%.

4.2.11 Ацетат натрия, безводный, массовая доля ()99,5%.

4.2.12 Уксусная кислота, массовая доля ()99,8%.

4.2.13 Хлорид цинка, массовая доля ()98%.

4.2.14 Цинк, порошок, размер частиц <63 мкм, массовая доля (Zn)97%.

4.2.15 Фосфатный буфер с рН 7,9-8,0

Растворяют 54,0 г калия фосфорнокислого однозамещенного (4.2.9) примерно в 350 см воды, регулируют рН до 7,9-8,0 раствором гидроксида калия (4.2.8) и разбавляют до 500 см водой.

4.2.16 Раствор хлорида-ацетата цинка

Взвешивают 13,7 г хлорида цинка (4.2.13), 4,1 г безводного натрия ацетата (4.2.11) и 3,0 г уксусной кислоты (4.2.12) и переносят в мерную колбу вместимостью 50 см, растворяют в метаноле (4.2.1) и объем содержимого колбы доводят до метки метанолом.

4.2.17 Липаза типа VII

Липаза из Candida rugosa с каталитической активностью 1000 Ед/мг или другой подходящий вариант. Могут использоваться другие источники фермента из видов Pseudomonas и Rhizopus с учетом разницы в показателях активности.

_______________

Например, L-1754; Sigma Chemical Со, P.O. 14508, Saint Louis МО 63178, USA (США). Указанный продукт использовался в межлабораторном испытании. Информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламой указанного продукта со стороны CEN. Могут быть использованы эквивалентные продукты, если было установлено, что они дают аналогичные результаты.

4.2.18 Подвижная фаза для ВЭЖХ.

Смешивают 100 смдихлорметана (4.2.4), 900 см метанола (4.2.1) и 5 см раствора хлорида-ацетата цинка (4.2.16). Фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм.