ГОСТ Р ИСО 29701-2015 Нанотехнологии. Наноматериалы для испытаний в тест-системах in vitro. Метод определения содержания эндотоксинов с использованием лизата амебоцитов Limulus (ЛАЛ-тест)

     2 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

2.1 коагулоген (coagulogen): Способный свертываться белок, в результате реакции которого с эндотоксинами при проведении ЛАЛ-теста происходит увеличение вязкости испытуемого раствора и образование плотного геля.

Примечание - Коагулоген получают из клеток крови японского мечехвоста (Tachypleus tridentatus). Коагулоген состоит из 175 аминокислот. Молекулярная масса коагулогена - 19723 [7].

2.2 коагулин (coagulin): Фрагмент коагулогена, образующийся в результате протеолиза коагулогена и свертывающегося фермента при проведении ЛАЛ-теста.

Примечание - Коагулин получают из клеток крови японского мечехвоста (Tachypleus tridentatus). Коагулин состоит из N-концевых фрагментов пептидов (Ala 1 - Arg 18) и С-концевых фрагментов пептидов (Gly47 - Phe175) [7].

2.3 эндотоксин (endotoxin): Компонент наружной части клеточной мембраны грамотрицательных бактерий.

Примечание - Основным активным компонентом эндотоксинов являются липополисахариды (ЛПС).

2.4 единица эндотоксина; ЕЭ (endotoxin unit; EU): Стандартная единица активности эндотоксинов.

Примечания

1 Комитетом экспертов по стандартизации биологических препаратов (КЭСБП) Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) в 1996 году установлено значение ЕА, соответствующее 0,1 нг или 10 ЕЭ/нг эндотоксинов кишечной палочки (Escherichia coli) Американского национального стандарта эндотоксина (АНСЭ) [8].

2 Одна ЕЭ соответствует одной международной единице (ME) эндотоксина.

2.5 чувствительность ЛАЛ-реактива (lambda, ): Значение концентрации эндотоксинов, заявленное изготовителем и используемое при вычислениях в гель-тромб тесте, при построении стандартной кривой в турбидиметрических и хромогенных методах, выраженное в ЕЭ/мл.

2.6 лизат амебоцитов Limulus; ЛАЛ-реактив (Limulus amebocyte lysate; LAL): Водная вытяжка из клеток крови (амебоцитов) мечехвоста Limulus polyphemus (ЛАЛ-реактив) или Tachypleus tridentatus (ТАЛ-реактив).

2.7 метод определения содержания эндотоксинов с использованием лизата амебоцитов Limulus; ЛАЛ-тест (Limulus amebocyte lysate test; LAL test): Способ определения количественной концентрации бактериальных эндотоксинов в испытуемом материале с применением ЛАЛ-реактива.

Примечание - ЛАЛ-тест имеет другое наименование "Испытание на бактериальные эндотоксины" (БЭТ).

2.8 оптическая плотность; ОП (optical density; OD): Величина, равная десятичному логарифму величины, обратной коэффициенту пропускания.

2.9 испытуемая проба (test sample): Водная суспензия или экстракт наноматериала, являющиеся объектом испытания.