Метод основан на количественном измерении каротиноидов с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) по обращенно-фазовому механизму. Разделение каротиноидов осуществляется на твердом носителе C8 в изократическом режиме с использованием в качестве подвижной фазы смеси тетрагидрофурана и воды в объемном соотношении 70:30.
Детектирование разделенных каротиноидов -каротина, лютеина и ликопина осуществляется с помощью спектрофотометрического детектора при длине волны 450 нм или диодноматричного детектора в диапазоне длин волн от 190 до 600 нм.
Идентификацию и количественный расчет пиков разделенных каротиноидов проводят при максимуме поглощения, указанном в таблице 1, что повышает избирательность хроматографического измерения. При необходимости, для повышения точности хроматографического измерения, идентификация -каротина, лютеина и ликопина в соковой продукции может проводиться в сравнении времени удерживания и спектра поглощения стандартного раствора.
Таблица 1 - Параметры идентификации каротиноидов
Наименование каротиноида | Ориентировочное время удерживания, мин | Максимум светопоглощения, нм |
-каротин | 13,8±0,2 | 450±5 |
Лютеин | 4,6±0,1 | |
Ликопин | 13,0±0,1 |