ГОСТ 32690-2014 Продукция соковая. Определение пестицидов методом тандемной высокоэффективной жидкостной хроматомасс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС/МС) (с Поправками)

     7 Проведение испытаний

7.1 Экстракция

10 г предварительно тщательно перемешанного сока или другого сокового продукта вносят в стакан (пробирку) для центрифугирования вместимостью 80 см с винтовой укупоркой*.

_______________

* Не допускается использование укупорки из резины или полимерных материалов, за исключением ПТФЭ.

В стакан добавляют 1,0 см воды по ГОСТ ИСО 3696 (в случае осветленных соков и другой осветленной соковой продукции) или 1,5 см (в случае соков и другой соковой продукции с мякотью). Перемешивают содержимое стакана стеклянной палочкой, затем вносят 20 см метанола.

Смесь интенсивно перемешивают в течение 2 мин с помощью высокоскоростной мешалки. После перемешивания от 30 см полученного экстракта отбирают не менее 10 см и центрифугируют в течение 5 мин при 3000 g.

В сухую мерную колбу вместимостью 10 см вносят 2,5 см раствора хлористого натрия. Объем раствора в колбе доводят до метки с помощью надосадочной жидкости, полученной после центрифугирования экстракта. Полученную разбавленную надосадочную жидкость используют для очистки.

7.2 Очистка

5 см разбавленной надосадочной жидкости наносят на стеклянную колонку (картридж) вместимостью 5 см, содержащую диатомовую землю (кизельгур). При необходимости содержимое колонки активируют в соответствии с указаниями его изготовителя. Картридж с внесенной пробой оставляют при комнатной температуре на 5 мин, затем проводят элюирование путем внесения в картридж 12,5 см дихлорметана. Элюат собирают в круглодонной колбе вместимостью 50 см. Элюирование повторяют, добавляя следующие 12,5 см дихлорметана. Элюат добавляют в колбу к первой фракции.

С помощью ротационного испарителя объединенные элюаты концентрируют до объема 0,5-2,0 см, затем отгоняют оставшийся дихлорметан в токе азота до получения сухого остатка.

В колбу с сухим остатком вносят 0,5 см метанола. Колбу закрывают чистой стеклянной пришлифованной пробкой. Определяют массу колбы с содержимым и пробкой. Укупоренную колбу переносят в ультразвуковую баню и осторожным покачиванием (для предотвращения потерь метанола) растворяют остаток. После растворения повторно определяют массу колбы. Если он уменьшился из-за испарения метанола, первоначальную массу восстанавливают путем добавления необходимого количества метанола.

0,5 см полученного раствора анализируемой пробы в метаноле фильтруют через мембранный одноразовый фильтр из ПТФЭ. Прозрачный фильтрат используют для инжекции в ВЭЖХ-МС/МС систему.

7.3 Приготовление анализируемой пробы из концентрированной соковой продукции

Концентрированную соковую продукцию восстанавливают бидистиллированной водой до минимального уровня растворимых сухих веществ, предусмотренного нормативными документами на конкретную соковую продукцию.

Концентрированную соковую продукцию, минимальные уровни растворимых сухих веществ для которой не предусмотрены, восстанавливают бидистиллированной водой до содержания растворимых сухих веществ 11,2%. Содержание растворимых сухих веществ контролируют по ГОСТ 29030.

Экстракцию и очистку восстановленных проб проводят по 7.1-7.2.

7.4 Проведение испытаний

7.4.1 Общие условия

Инжекцию подготовленных по 7.1 и 7.2 анализируемых проб и градуировочных растворов пестицидов проводят в выбранной последовательности. Наиболее распространен способ, когда инжекция градуировочных растворов начинает и завершает серию инжекций проб.

ВЭЖХ-МС/МС система должна быть настроена на режим контроля выбранных реакций с переходами, обеспечивающими селективное детектирование анализируемых пестицидов. Примеры ВЭЖХ/СВЭЖХ-МС/МС систем, условия разделения и масс-спектрометрического детектирования приведены в приложении А.

7.4.2 Идентификация остатков пестицидов

Для идентификации остатков пестицидов, полученных на растворах анализируемых проб, их времена удерживания сравнивают со временем удерживания соответствующих пестицидов из градуировочных растворов. Для подтверждения присутствия остатков пестицидов проводят сравнение соотношения интенсивностей сигналов из первого и второго SRM (MRM)-перехода с соотношением интенсивностей сигналов остатков пестицидов из градуировочных растворов. Соотношение пиков для одного пестицида не должно отличаться более чем на 20% от ожидаемого соотношения интенсивностей сигналов.

Для количественного определения пестицидов в анализируемой пробе используют градуировочные растворы по 6.3.3. Данный способ рекомендуется, если в ходе определения не выявляются существенные эффекты влияния матрицы пробы.

В случае если предполагается наличие значимых концентраций пестицидов, в том числе превышающих максимально допустимые уровни, количественное определение проводят по способу добавленного пестицида (см. 8.2).