МУК 4.2.3145-13 Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов

1.1.2. Диагностические признаки возбудителей гельминтозов

Для видовой идентификации яиц гельминтов при микроскопии препаратов используются следующие морфологические признаки:

1) Размеры: измеряют длину и ширину обнаруженных яиц. Для каждого вида гельминта характерна определенная величина яиц, которая варьирует от среднего значения (рис.1).

2) Форма: яйца гельминтов в основном имеют эллипсоидную форму, вытянутую в разной степени, часто асимметричны.

3) Толщина оболочки яиц разных видов гельминтов сильно различается: от очень тонкой (как у анкилостоматид) до толстой многослойной с наружной крупнобугристой белковой оболочкой, характерной для яиц аскарид.

4) Цвет: яйца некоторых видов гельминтов окрашены в желто-коричневый цвет уже в матке самок (у большинства трематод), у других - изначально бесцветны, но прокрашиваются пигментами испражнений в темно-желтый или коричнево-бурый цвет по мере прохождения по кишечнику (яйца аскарид, власоглава), встречаются и неокрашенные яйца, например, у анкилостоматид, остриц, карликового цепня.

5) Наличие морфологических особенностей таких, как крышечки, шипы, пробки, крючки или фестончатая наружная оболочка.

6) Внутреннее содержимое: яйца выделяются из матки гельминтов на разных стадиях развития: они могут содержать практически неразличимый зародыш, окруженный желточными клетками, один или несколько хорошо заметных бластомеров или сформированную личинку. Если пробы кала исследуют через несколько часов или спустя 1-2 дня после дефекации, яйца некоторых нематод могут развиваться до более взрослых стадий, что следует учитывать при диагностике.

При обнаружении яйца гельминта или похожего на него объекта следует тщательно оценить все перечисленные признаки, чтобы установить видовой диагноз.

Иллюстрация возбудителей глистных инвазий приведены в прилож.2, 3, 4.

Видовая диагностика трематодозов

Представители класса Trematoda, паразитирующие у человека, локализуются в разных органах, в связи с чем условно разделены на 4 группы: I - трематоды, паразитирующие в гепатобилиарной системе (сем. Opisthorchidae, Fasciolidae, Dicrocoeliidae); II - кишечные трематоды (сем. Heterophyidae, Nanophyetidae и др.); III - легочные трематоды (сем. Paragonimidae) и IV - трематоды кровеносной системы (сем. Schistosomatidae). В соответствии с этим, яйца I группы трематод могут быть выявлены в дуоденальном содержимом и кале; II группы - только в кале (в связи с тем, что продолжительность жизни кишечных трематод невелика, в кале можно обнаружить и самих взрослых паразитов); III группы - в мокроте и кале, так как мокрота часто заглатывается; IV - в кале или моче в зависимости от вида паразита и его локализации в организме хозяина.

Яйца разных видов трематод существенно отличаются по размеру: от самых мелких, присущих кишечным трематодам, до самых крупных, таких как яйца фасциол. Оболочки яиц чаще всего тонкие и ровные, за исключением таковых у D. lanceatum, Sch. japonicum и видов Paragonimus.

Цвет оболочек яиц разных видов трематод варьирует от желтовато-золотистого до буро-коричневого.

Наиболее характерным признаком практически всех яиц трематод - паразитов человека, является наличие крышечки, которая открывается для выхода созревшей личинки - мирацидия во внешнюю среду. Крышечка может быть разной высоты, примыкает к скорлупе яйца плотно, так что становится практически неразличимой. Край крышечки может быть в виде ровной тонкой или волнистой линии. Часто оболочка перед крышечкой образует валик, выраженный в разной степени. При рассматривании яйца под микроскопом этот валик виден в виде выступов с его боков, так называемых "плечиков". Размер их, высота крышечки и способ ее прилегания являются важными систематическими признаками. Яйца шистосом крышечки не имеют, при выходе мирацидия оболочка яйца разрывается.

На противоположном полюсе от крышечки находится в разной степени развитый бугорок: от небольшого утолщения оболочки до выраженного выроста - "шишечки", иногда широкой. Яйца шистосом снабжены шипами, место их расположения и размер является видовым признаком.

Яйца возбудителей описторхоза, шистосомозов и некоторых кишечных трематод выделяются из матки самок полностью зрелыми со сформированной личинкой - мирацидием внутри, которая хорошо видна при микроскопировании. Яйца возбудителей фасциолеза, парагонимоза, нанофиетоза содержат плохо различимый зародыш в центре, окруженный желточными клетками. Развитие этих яиц происходит во внешней среде.

Сравнительная характеристика морфологических признаков яиц трематод представлена в прилож.2.

При обнаружении в кале яиц D. lanceatum и F. hepatica следует помнить, что они могут быть транзитными. При употреблении в пищу печени крупного и мелкого рогатого скота, зараженного возбудителями фасциолеза или дикроцелиоза, их яйца при недостаточной термической обработке могут сохраняться и транзитом проходить через желудочно-кишечный тракт человека, обнаруживаясь затем в кале. Необходимо повторное исследование после исключения из пищи указанных продуктов.

Видовая диагностика цестодозов

Класс ленточных гельминтов относится к типу плоских червей и делится на два отряда - лентецов и цепней.

К отряду лентецов относятся 3 вида возбудителей дифиллоботриоза, встречающихся на территории Российской Федерации (Diphyllobothrium latum, D. dendriticum, D. luxi). В связи с тем, что матка хвостовых члеников Diphyllobothriidae имеет выводное отверстие, в кале обнаруживаются яйца, имеющие характерное строение: они сероватого цвета, овальной формы с тонкой двуконтурной оболочкой. На одном полюсе имеются крышечки, на другом - утолщение оболочки в виде бугорка. Последний виден не всегда, особенно при работе методом Като. В центре яйца находится зародышевая клетка. По яйцам Diphyllobothriidae невозможно определить видовую принадлежность лентеца, в связи с чем при записи результатов анализа указывают "обнаружены яйца Diphyllobothriidae sp.".

Дифференциальная диагностика лентецов и цепней приведена в прилож.3.

К отряду цепней относятся Taenia solium, Taeniarhynchus saginatus, Taenia asiatica, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Dipylidium caninum.

Taeniarhynchus saginatus - возбудитель бычьего цепня и Taenia solium - возбудитель свиного цепня локализуются в тонком кишечнике. Строение яиц этих двух видов возбудителей одинаковое. Яйцо имеет тонкую прозрачную оболочку с двумя нитевидными придатками. Внутри яйца находится зародыш (онкосфера) почти правильной круглой формы, окруженной толстой оболочкой желтовато-коричневого цвета и снабженной тремя парами крючьев. Оболочка яйца, как правило, быстро разрушается и при исследовании кала видна только онкосфера. Онкосферы бычьего цепня обнаруживаются при исследованиях перианальных отпечатков, возможно их обнаружить и в кале. При записи результатов исследований указывают "обнаружены онкосферы Taeniidae g. sp.".

Дифференциальная диагностика Т. solium и Т. saginatus проводится по концевым членикам (прилож.3).

Во внешнюю среду вместе с калом могут выделяться членики Т. saginatus, Т. solium, Diphyllobothriidae sp. и D. caninum. Членики бычьего цепня часто отходят активно, что у свиного цепня наблюдается исключительно редко. При этих инвазиях, а также и при дифиллоботриозе возможно отхождение кусков стробилы. Диагностика проводится по форме членика - соотношение ширины и длины - и особенностям строения матки:

концевой членик Т. saginatus имеет ширину меньшую, чем длину. Матка замкнутая, имеет центральный ствол с большим числом боковых ответвлений - до 30 и более;

концевой членик Т. solium также имеет ширину меньшую, чем длину. Матка замкнутая, имеет центральный ствол с небольшим числом боковых ответвлений - до 10-12;