МУК 4.2.3145-13 Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов

1.1.1.2.4. Модификация метода седиментации с применением минисистемы "Real"

Необходимые реактивы и оборудование

Комплект "концентратор - минисистема "Real", содержащий готовые реактивы "Экосаф"

Обезжиренные предметные и покровные стекла

Пипетки

Раствор Люголя 2%-й

Центрифуга

Микроскоп

Подготовка к исследованию

1) Минисистема "Real" состоит из двух герметически соединенных пробирок. Верхняя пробирка содержит 4,0 мл консервирующей смеси "Экосаф", стеклянные бусы и фильтр, в крышку вмонтирована ложечка для сбора кала.

2) В смеси "Экосаф" минисистемы "Real" содержится: ацетат натрия - 0,9%; ледяная уксусная кислота - 2,0%; формальдегид 34-38% - 1,6%; метанол - 0,4%; неионный детергент Тритон Х-100 - 0,16%; дистиллированная вода.

3) Пробу кала объемом одной ложечки минисистемы "Real" помещают в верхнюю пробирку со смесью "Экосаф". Крышка пробирки плотно закручивается.

4) Пробирка минисистемы "Real" с пробой кала энергично встряхивается в течение 30 с до получения однородной взвеси.

5) После получения взвеси пробирка переворачивается верх дном, отвинчивается нижняя крышка и к ней плотно закручивается коническая центрифужная пробирка.

6) Герметически соединенные верхняя и нижняя пробирки помещают в центрифугу и центрифугируют в течение 3 мин при скорости 2000 об./мин.

7) В процессе центрифугирования происходит фильтрация суспензии.

8) В конической части нижней пробирки остается жидкая часть пробы с выделившимися в нее возбудителями кишечных паразитозов.

9) Отсоединяют верхнюю пробирку с фильтром, которая помещается в дезинфекционный раствор для обеззараживания.

10) Для микроскопирования с помощью пипетки из нижней пробирки на предметное стекло переносят 2 капли пробы осадка.

11) Осадок суспендируется: одна капля осадка помещается на предметное стекло, а во вторую каплю наносится 2%-й раствор Люголя. Препараты накрываются покровными стеклами.

12) Микроскопируют при увеличении: окуляр 10, объективы 10, 40.

Примечание. Если пробы кала доставлены в консерванте (например, Турдыева), то отобранную пробу кала центрифугируют при 1000-1500 об./мин, надосадочную часть жидкости сливают. Осадок исследуется согласно пп.3-11.

Применение. Модифицированный метод седиментации с применением минисистемы "Real" имеет все преимущества методов седиментации. Дополнительным преимуществом метода является отсутствие летучих ингредиентов в составе реактива "Экосаф".