ГОСТ EN 14122-2013 Продукты пищевые. Определение витамина В(1) с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии

     4 Реактивы

4.1 Общие положения

Для проведения анализа при отсутствии особо оговоренных условий используют только реактивы гарантированной аналитической чистоты и воду не ниже первой степени чистоты по EN ISO 3696 или бидистиллированную воду.

4.2 Реактивы и растворы

4.2.1 Метанол для ВЭЖХ чистотой не менее 99,8%.

4.2.2 Кислота уксусная, раствор молярной концентрации 0,02 моль/дм.

4.2.3 Спирт изобутиловый (изобутанол) чистотой не менее 98%.

4.2.4 Натрий фосфорнокислый однозамещенный чистотой не менее 99,8%.

4.2.5 Кислота соляная массовой долей 36%.

4.2.6 Кислота соляная, раствор молярной концентрации 0,1 моль/дм.

4.2.7 Кислота серная, раствор молярной концентрации 0,05 моль/дм.

4.2.8 Натрия гидроокись чистотой не менее 99%.

4.2.9 Натрия гидроокись, раствор массовой концентрации 150 г/дм.

4.2.10 Натрия гидроокись, раствор массовой концентрации 200 г/дм.

4.2.11 Калия гексацианоферрат (III) чистотой не менее 99%.

4.2.12 Калия гексацианоферрат (III), раствор массовой концентрации 10 г/дм.

4.2.13 Калия гексацианоферрат (III), щелочной раствор массовой концентрации 0,4 г/дм для предколоночной дериватизации

Раствор гексацианоферрата (III) калия (см. 4.2.12) объемом 2 см разбавляют раствором гидроокиси натрия (см. 4.2.9) до объема 50 см.

Раствор готовят в день проведения испытания.

4.2.14 Калия гексацианоферрат (III), щелочной раствор массовой концентрации 0,5 г/дм для послеколоночной дериватизации

Раствор гексацианоферрата (III) калия (см. 4.2.12) объемом 2,5 см разбавляют раствором гидроокиси натрия (см. 4.2.10) до объема 50 см.

4.2.15 Дефосфорилирующий фермент, пригодный для гидролиза связанного тиамина в пробе.

Примечание - При установлении характеристик прецизионности методики использована така-диастаза*.

________________

* Така-диастаза N Т00040 - торговое наименование изделия, выпускаемого Platz and Bauer, Waterbury, СТ 06708, США. Данная информация приведена для удобства пользования настоящего стандарта и не является рекламной поддержкой МГС данного изделия. Допускается использовать аналогичные изделия при условии обеспечения идентичных результатов.

4.2.16 Натрий уксуснокислый, раствор молярной концентрации 2,5 моль/дм.

4.2.17 Натрий уксуснокислый, раствор молярной концентрации 0,5 моль/дм.

4.2.18 Подвижные фазы для ВЭЖХ

Варианты подвижных фаз подходящего состава приведены в приложении A. В частности, в качестве подвижных фаз используют смеси метанола с водой, фосфатным или ацетатным буферным раствором при объемной доле метанола от 10% до 50%, а также подвижные фазы с добавлением ион-парных реагентов.