ГОСТ Р 55448-2013 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение содержания охратоксина А методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуориметрическим детектированием

     7 Подготовка к проведению испытаний

7.1 Условия проведения испытаний

При подготовке и проведении испытаний должны быть соблюдены следующие условия:

7.2 Подготовка проб

Подготовка проб - по ГОСТ Р 51419 со следующим дополнением. Из подготовленной лабораторной пробы выделяют пробу массой не менее 100 г. Измельчают ее в лабораторной мельнице до прохода через сито с размером ячеек 1,0 мм и отбирают анализируемую пробу массой (5,00±0,01) г.

Консервированные и влажные корма гомогенизируют, для чего лабораторную пробу пропускают через мясорубку с размером ячеек в пластинке 4,0 мм, тщательно перемешивают, выделяют пробу массой не менее 100 г и отбирают анализируемую пробу массой (5,00±0,01) г.

7.3 Подготовка лабораторной посуды

Посуду для приготовления и хранения подвижной фазы моют только серной кислотой (без применения других моющих средств), тщательно промывают водопроводной водой и ополаскивают дистиллированной водой.

Остальную стеклянную посуду моют горячей водой с моющим средством, тщательно ополаскивают дистиллированной водой и сушат в сушильном шкафу при температуре 105 °С.

7.4 Приготовление растворов для испытаний

7.4.1 При приготовлении и хранении растворов не допускается использование резиновых и корковых пробок.

Приготовленные растворы хранят в условиях, исключающих испарение их компонентов.

7.4.2 Приготовление подвижной фазы (смесь ацетонитрила, воды и уксусной кислоты в объемном соотношении 43:56:1)

В стеклянную емкость вместимостью 1000 см с плотно закрывающейся пришлифованной или полиэтиленовой пробкой помещают 215 см ацетонитрила, 280 см дистиллированной воды и 5 см ледяной уксусной кислоты. Смесь тщательно перемешивают и хранят не более 1 мес при комнатной температуре.

7.4.3 Приготовление раствора уксусной кислоты объемной доли 1%

В мерную колбу вместимостью 200 см помещают 2 см ледяной уксусной кислоты и доводят объем в колбе до метки дистиллированной водой. Тщательно перемешивают и хранят в стеклянной емкости с плотно закрывающейся пришлифованной или полиэтиленовой пробкой не более 1 мес.

7.4.4 Приготовление смеси хлороформа и муравьиной кислоты в объемном соотношении 100:2

В плоскодонную колбу вместимостью 250 см помещают 200 см хлороформа и 4 см муравьиной кислоты. Добавляют 10 г безводного сернокислого натрия. Смесь тщательно перемешивают, фильтруют через фильтр "красная лента" и хранят в стеклянной емкости с пришлифованной или полиэтиленовой пробкой не более 1 мес.

7.4.5 Приготовление растворов охратоксина А

7.4.5.1 Все растворы охратоксина А хранят в холодильнике при температуре не выше 6 °С.

7.4.5.2 Приготовление исходного раствора охратоксина А номинального значения массовой концентрации 1 мкг/см

Пипеткой отбирают 1 см стандартного образца состава раствора охратоксина А в ацетонитриле массовой концентрации 50 мкг/см, помещают в мерную колбу вместимостью 50 см и доводят объем до метки ацетонитрилом.

Срок хранения приготовленного раствора - не более 6 мес.

7.4.5.3 Приготовление раствора охратоксина А в ацетонитриле номинального значения массовой концентрации 100 нг/см

В мерную колбу вместимостью 50 см помещают 5 см раствора охратоксина А номинального значения массовой концентрации 1 мкг/см по 7.4.5.2, что соответствует 1000 нг/см, и доводят объем до метки ацетонитрилом.

Срок хранения полученного раствора - не более 3 мес.