ГОСТ ISO/TS 22117-2013 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Специальные требования и руководство по проверке квалификации лабораторий с помощью межлабораторных сравнительных испытаний

     6 Верификация образца организатором проверки

6.1 Общие положения

Общие требования к верификации образца приведены в ISO/IEC 17043 и ISO 13528 (для дополнительной информации также см. [9]); в данном разделе описаны конкретные требования и проблемы испытаний на однородность и стабильность материалов, содержащих живые микроорганизмы.

6.2 Испытание образцов на однородность. Общие проблемы

(См. также ISO/IEC 17043, 4.4.3 и В.5.)

Проверка квалификации лабораторий может включать подготовку массы материала для испытания, которая затем будет разделена на отдельные порции, максимально подобные друг другу, для распределения по участникам. В другом случае такие порции можно до распределения по участникам засеять культурой.

Независимо от того, какой метод подготовки был использован, испытуемый материал необходимо оценить на однородность, обычно для нестабильных свежих материалов это выполняют до или во время испытаний.

Испытание на однородность следует выполнять на каждой партии образцов, на основе соответствующих статистических принципов (ISO/IEC 17043, 4.4.3.2 и В.5). Такие испытания приводятся в ISO 13528 или как альтернатива в Приложении В.

Испытание на однородность также необходимо выполнить в том случае, если материалы необходимо хранить в течение длительного периода, чтобы обеспечить соответствие критериям до начала испытаний. Количество образцов для испытания от каждой партии также должно быть достаточным, чтобы получить достаточную информацию об однородности партии; предлагается испытать 10 образцов (в параллельных определениях, если требуется).

Материал для испытания, который является недостаточно однородным, они все же могут использоваться как образцы для проверки квалификации лабораторий, (ISO/IEC 17043, 4.4.3.1 Примечание 3), при условии использования соответствующих статистических принципов, чтобы учесть большее расхождение между образцами (см. ISO 13528). Статистический план для гетерогенных материалов, включая анализ повторных проб нескольких образцов (см. ISO 5725-5), следует использовать для минимизации влияния недостатка однородности на оценку показателей лаборатории-участницы.

6.3 Испытание на однородность образцов для количественного анализа (подсчета)

Общие требования и методы испытания на однородность образцов для проверки квалификации лабораторий в количественном анализе приведены в ISO/IEC 17043, 4.4.3 и В.5, а также в ISO 13528.

Материалы, которые показывают достаточно большую изменчивость между параметрами образцов, значительно влияющую на оценку показателей лабораторий-участниц, не следует использовать в межлабораторных исследованиях, если только не применяются специальные требования и методы анализа данных, например, низкое количество микроорганизмов в питьевой воде и других образцах.

Критерий для оценки "достаточно однородный (материал)" определяется требованиями межлабораторного сравнения (см. ISO 13528 и Приложение В). В то же время, в общем, достаточно однородным считается материал, для которого стандартное отклонение между образцами (на соответствующим образом модифицированной шкале) будет , где - целевое стандартное отклонение, используемое для оценки показателей лабораторий (см. ISO 13528).

Любое альтернативное испытание на однородность должно удовлетворять следующим критериям (взято из [9]):

a) вероятность браковки достаточно однородного материала должна быть 5%;

b) вероятность браковки испытуемого материала, для которого вариация между образцами составляет 1,5, а является приемлемой межлабораторной изменчивостью (выраженной как целевое стандартное отклонение), будет 80%.

Вероятность браковки материала, равная 80%, там, где изменчивость образцов составляет 1,5, основана на исследовании с помощью моделирования параллельного анализа 10 образцов методом, имеющим аналитическое стандартное отклонение 0,5 (т.е. 0,125 логарифмических единиц), и критическое значение для (см. приложение В), которое удовлетворяет критерию а) предыдущего абзаца. Она представляет то, чего можно достичь при целесообразном анализе.

Испытания на однородность основаны на оценках дисперсии образцов и дисперсии анализа (повторяемости), полученных в условиях повторяемости. Подходящие методы измерения изменчивости приведены в приложении В.

Дисперсию анализа (повторяемость) следует оценивать по анализам повторных образцов исходных суспензий, полученных из анализируемых проб [15], [16]. Такую аналитическую дисперсию можно также рассчитать по количеству подсчитанных колоний и прецизионности используемых аналитических материалов [10].

В микробиологии изменчивость образцов должна оцениваться в условиях повторяемости (за один раз). Если это невозможно, дисперсия между образцами включит внутрилабораторную воспроизводимость и может привести к ложной браковке удовлетворительного материала.

Если число подсчитанных колоний достаточно высоко (более 35-40 колоний на чашку), аналитическое стандартное отклонение, , обычно удовлетворяет неравенству

,

где - целевое стандартное отклонение, и следует использовать испытание на достаточную однородность, предложенное в [11] (см. приложение В). Если число подсчитанных колоний меньше (меньше 35-40 колоний на чашку), то рекомендуется измерить разность (см. приложение В).

Если для лабораторий-участниц предусмотрены повторные образцы, то изменчивость образцов, полученная участниками, подлежит изучению организатором проверки, чтобы оценить однородность материала. Хотя такая изменчивость включает внутрилабораторную воспроизводимость, большее число лабораторий-участниц увеличивает статистическую мощность анализа и может стать хорошим индикатором успешных этапов исследования.

Если число подсчитанных колоний совсем невелико (скажем, меньше 20), аналитическая дисперсия (повторяемость) будет высокой. В этом случае организатору проверки следует рекомендовать лабораториям-участницам повторять подсчеты колоний на анализируемых пробах, чтобы выполнить следующее условие (см. ISO 13528):

,

     
где - стандартное отклонение повторяемости;