ГОСТ EN 15891-2013 Продукты пищевые. Определение дезоксиниваленола в продовольственном зерне, продуктах его переработки и продуктах на зерновой основе для питания грудных детей и детей раннего возраста. Метод ВЭЖХ с применением иммуноаффинной колоночной очистки экстракта и спектрофотометрического детектирования в ультрафиолетовой области спектра

     4 Реактивы

4.1 Общие положения

Для проведения анализа при отсутствии особо оговоренных условий используют только реактивы гарантированной аналитической чистоты и воду не ниже первой степени чистоты по EN ISO 3696:1995. Используемые растворители по степени чистоты должны быть пригодны для применения в анализе с помощью ВЭЖХ. Допускается использовать доступные для приобретения готовые растворы, характеристики которых не отличаются от приведенных ниже.

4.2 Натрий фосфорнокислый двухзамещенный безводный или гидратированный .

4.3 Калий хлористый.

4.4 Калий фосфорнокислый однозамещенный.

4.5 Натрий хлористый.

4.6 Натрия гидроксид.

4.7 Кислота соляная, раствор массовой долей 37%.

4.8 Кислота соляная, раствор молярной концентрации 0,1 моль/дм

Раствор готовят разбавлением 8,28 см раствора соляной кислоты по 4.7 водой до 1 дм.

4.9 Натрия гидроксид, раствор молярной концентрации 0,1 моль/дм

Раствор готовят растворением 4 г гидроксида натрия по 4.6 в 1 дм воды.

4.10 Раствор фосфатно-хлоридный буферный молярной концентрации хлористого натрия 120 ммоль/дм, хлористого калия 2,7 ммоль/дм, фосфатного буфера 10 ммоль/дм, 7,4 ед. рН

Растворяют 8,0 г хлористого натрия по 4.5, 1,2 г безводного двухзамещенного фосфорнокислого натрия [или 2,9 г гидратированного двухзамещенного фосфорнокислого натрия ] по 4.2, 0,2 г однозамещенного фосфорнокислого калия по 4.4 и 0,2 г хлористого калия по 4.3 в 900 см воды.

Значение рН приготовленного раствора доводят до 7,4 ед. рН путем добавления раствора соляной кислоты по 4.8 либо раствора гидроксида натрия по 4.9, после чего объем раствора доводят водой до 1 дм. В качестве альтернативы допускается использовать доступный для приобретения готовый раствор с аналогичными характеристиками.

4.11 Ацетонитрил.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Ацетонитрил является токсичным веществом, поэтому все операции по приготовлению растворов, содержащих ацетонитрил, следует проводить в вытяжном шкафу с использованием взрывобезопасного перемешивающего устройства. Фильтрование растворов, содержащих ацетонитрил, следует проводить также в вытяжном шкафу.

4.12 Полиэтиленгликоль молекулярной массой около 8000 г/моль.

4.13 Метанол.

4.14 Кислота уксусная массовой долей 96% или кислота уксусная ледяная массовой долей 100%.

4.15 Растворитель - дилюент для приготовления раствора пробы для анализа с помощью ВЭЖХ

Смешивают 9,5 объемных частей метанола по 4.13 с 90,5 объемными частями воды.

4.16 Подвижная фаза для ВЭЖХ

Смешивают 15 объемных частей метанола по 4.13 с 85 объемными частями воды. К полученной смеси добавляют 0,1 объемной части уксусной кислоты по 4.14. При необходимости проводят корректировку состава подвижной фазы (объемной доли метанола и присутствия в ней уксусной кислоты) применительно к выбранной аналитической колонке для ВЭЖХ. Перед использованием подвижную фазу дегазируют.

4.17 Подвижная фаза для кондиционирования аналитической колонки

Смешивают 50 объемных частей метанола по 4.13 с 50 объемными частями воды.

4.18 Колонка с иммуноаффинным сорбентом

Для проведения испытания пригодна колонка с иммуноаффинным сорбентом, содержащим иммобилизованные антитела, специфичные в отношении дезоксиниваленола, имеющая сорбционную емкость по дезоксиниваленолу не менее 1000 нг и обеспечивающая полноту обнаружения не менее 80% при внесении в нее 500 нг дезоксиниваленола в водном растворе объемом от 1 до 2 см.