ГОСТ EN 15835-2013 Продукты пищевые. Определение охратоксина А в продуктах на зерновой основе для питания грудных детей и детей раннего возраста. Метод ВЭЖХ с применением иммуноаффинной колоночной очистки экстракта и флуориметрического детектирования

     4 Реактивы

4.1 Общие положения

Для проведения анализа при отсутствии особо оговоренных условий используют только реактивы гарантированной аналитической чистоты и воду не ниже первой степени чистоты по ЕN ISO 3696:1995. Используемые растворители по степени чистоты должны быть пригодны для применения в анализе с помощью ВЭЖХ. Допускается использовать доступные для приобретения готовые растворы при условии, что их характеристики не отличаются от приведенных ниже.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Утилизацию отработанных растворителей проводят в соответствии с требованиями законодательства по охране окружающей среды. Способы обезвреживания отработанных реактивов приведены в материалах Международного агентства по исследованию рака (IARC) [4].

4.2 Гелий газообразный очищенный сжатый.

4.3 Азот.

4.4 Натрий фосфорнокислый двухзамещенный безводный (NaHPO) или гидратированный (NaHPO·12HO).

4.5 Калий хлористый.

4.6 Калий фосфорнокислый однозамещенный.

4.7 Натрий хлористый.

4.8 Натрия гидроксид.

4.9 Аммония гидроксид, водный раствор массовой долей w (NHOH)=25% (реактив для послеколоночной дериватизации).

Перед использованием раствор дегазируют с применением дегазатора по 5.21.7.

4.10 Кислота соляная, раствор массовой долей w (HCl)=37% (по результатам ацидиметрического анализа).

4.11 Кислота фосфорная, раствор массовой долей w (HPO)=85%.

4.12 Кислота соляная, раствор молярной концентрации c(HCl)=0,1 моль/дм

Раствор готовят разбавлением 8,28 см раствора соляной кислоты по 4.10 водой до 1 дм.

4.13 Натрия гидроксид, раствор молярной концентрации c(NaOH)=0,1 моль/дм

Раствор готовят растворением 4 г гидроксида натрия по 4.8 в 1 дм воды.

4.14 Раствор фосфатно-хлоридный буферный молярной концентрации хлористого натрия c(NaCl)=120 ммоль/дм, хлористого калия c(KCl)=2,7 ммоль/дм, фосфатного буфера c(NaHPO+KHPO)=10 ммоль/дм, рН 7,4

Растворяют 8,0 г хлористого натрия по 4.7, 1,2 г безводного двухзамещенного фосфорнокислого натрия [или 2,9 г гидратированного двухзамещенного фосфорнокислого натрия (NaHPO·12HO)] по 4.4, 0,2 г однозамещенного фосфорнокислого калия по 4.6 и 0,2 г хлористого калия по 4.5 в 900 см воды.

Значение рН приготовленного раствора доводят до 7,4 ед. рН путем добавления раствора соляной кислоты по 4.12, либо раствора гидроксида натрия по 4.13, после чего объем раствора доводят водой до 1 дм. В качестве альтернативы допускается использовать доступный для приобретения готовый раствор с аналогичными характеристиками.

4.15 Смешанный раствор фосфорной кислоты концентрации 0,5 моль/дм и хлористого натрия молярной концентрации 2 моль/дм

Растворяют 118 г хлористого натрия по 4.7 примерно в 900 см воды. К раствору добавляют 33 см фосфорной кислоты по 4.11, объем полученного раствора доводят водой до 1 дм.

4.16 Кислота уксусная ледяная массовой долей w (CHCOOH)99,7%.

4.17 Кислота уксусная, раствор объемной долей 9%

Смешивают 90 см уксусной кислоты по 4.16 и 910 см воды.

4.18 Гексан.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Гексан является легковоспламеняющимся веществом. Все операции, предполагающие использование этого растворителя, должны проводиться в вытяжном шкафу. Длительный контакт с этим реактивом может привести к серьезным последствиям для здоровья.

4.19 Метанол для градиентной ВЭЖХ.