ГОСТ EN 15835-2013 Продукты пищевые. Определение охратоксина А в продуктах на зерновой основе для питания грудных детей и детей раннего возраста. Метод ВЭЖХ с применением иммуноаффинной колоночной очистки экстракта и флуориметрического детектирования

     3 Сущность метода

Анализируемую пробу экстрагируют метил-третбутиловым эфиром после добавления смешанного раствора фосфорной кислоты молярной концентрации 0,5 моль/дм и хлористого натрия молярной концентрации 2 моль/дм. Экстракт выпаривают и перерастворяют в смеси метанола с фосфатно-хлоридным буферным раствором. После удаления липофильных компонентов гексаном экстракт пропускают через колонку с иммуноаффинным сорбентом, содержащим антитела, специфичные к охратоксину А. Охратоксин А элюируют с колонки метанолом и определяют с помощью ВЭЖХ с детектированием по флуоресценции, для усиления которой применяют послеколоночную дериватизацию аммиаком.

Примечание - В некоторых исследованиях показана возможность использования ВЭЖХ без послеколоночной дериватизации аммиаком, однако чувствительность определения при этом, как минимум, в два раза ниже. В этом случае необходимо использовать другие параметры флуориметрического детектирования (длину волны возбуждения 333 нм, длину волны эмиссии 460 нм).