Статус документа

ГОСТ 10444.11-2013 (ISO 15214:1998) Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Методы выявления и подсчета количества мезофильных молочнокислых микроорганизмов (с Поправками)

5 Растворы для разведений, питательные среды, растворы реактивов

5.1 Растворы для разведений

Растворы для разведений - по [1]-[4] и ГОСТ 26669 или любому другому стандарту, касающемуся исследуемого продукта.

5.2 Питательные среды, растворы реактивов

5.2.1 Среда MRS

5.2.1.1 Состав


Ферментативный перевар казеина, г	10,0
Мясной экстракт, г	10,0
Дрожжевой экстракт, г	4,0
Триаммоний цитрат , г	2,0
Натрия ацетат , г	5,0
Магния сульфат , г	0,2
Марганца сульфат , г	0,05
Калия гидрофосфат , г	2,0
Глюкоза , г	20,0
Полиоксиэтиленсорбитан (Tween 80), г	1,08
Агар	от 12 до 18,0
Вода, см	1000
в зависимости от желирующих свойств; для приготовления питательных сред и реактивов используют дистиллированную воду по ГОСТ 6709.

5.2.2 Приготовление

Растворяют компоненты или дегидратированную готовую среду в воде при нагревании. С помощью рН-метра (см. 6.5) устанавливают рН, так чтобы после стерилизации он составлял (5,7±0,1) ед. рН при температуре 25°С.

Переносят среду в сосуды соответствующей вместимости и стерилизуют в автоклаве (см. 6.1) при температуре (121±1)°С в течение 15 мин.

Если среду необходимо использовать немедленно, то ее охлаждают до температуры приблизительно 47°С на водяной бане (см. 6.4) или любым другим способом, дающим аналогичные результаты.

Если среда не будет использоваться сразу, то перед началом микробиологических исследований среду полностью расплавляют на кипящей водяной бане, а затем охлаждают до температуры приблизительно 47°С на водяной бане (см. 6.4).

Если предполагается значительное содержание дрожжей в испытуемом продукте (например, в сухой колбасе), то добавляют сорбиновую кислоту в агар MRS. Для этого растворяют 1,4 г сорбиновой кислоты приблизительно в 10 см раствора гидроксида натрия молярной концентрацией 1 моль/дм. Раствор стерилизуют фильтрованием. Добавляют этот раствор в 1000 см стерилизованного агара MRS, предварительно охлажденного до температуры приблизительно 47°С. Конечное значение рН среды должно быть (5,7±0,1) ед. рН при температуре 25°С.

5.3 Среда Бликфельдта плотная

5.3.1 Состав


Пептон, г	5,0
Лактоза, г	10,0
Глюкоза, г	10,0
Экстракт дрожжевой, г	10,0
Кальций углекислый, г	5,0
Агар	от 12 до 18,0
Вода, см	1000
в зависимости от желирующих свойств.

5.3.2 Приготовление

Растворяют компоненты или дегидратированную готовую среду в воде при нагревании. С помощью рН-метра (см. 6.5) устанавливают рН, так чтобы после стерилизации он составлял (7,3±0,1) ед. рН при температуре 25°С.

Переносят среду в сосуды соответствующей вместимости и стерилизуют в автоклаве (см. 6.1) при температуре (117±1)°С не более 15 мин.

Перед разливкой по чашкам Петри среду осторожно перемешивают, чтобы углекислый кальций распределился равномерно.

5.4 Жидкая среда Бликфельдта