ГОСТ 32011-2013 (ISO 16654:2001) Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный метод обнаружения Escherichia coli О157 (с Поправкой)
5 Питательные среды, реактивы и антисыворотки
Общие правила микробиологических исследований - по ГОСТ ISO 7218.
5.1 Обогатительная среда (модифицированный триптон-соевый бульон с новобиоцином (mTSB+N)
Состав:
Ферментативный перевар казеина | 17,0 г | |||
Ферментативный перевар сои | 3,0 г | |||
D(+)-глюкоза | 2,5 г | |||
Желчные соли No.3 | 1,5 г | |||
Хлорид натрия | 5,0 г | |||
Моногидрофосфат калия (K | 4,0 г | |||
Дистиллированная вода | 1000 см | |||
5.1.1 Приготовление среды
Растворяют компоненты или готовую дегидратированную питательную среду в воде, при необходимости подогревают. Устанавливают уровень pH, используя pH-метр (см. 6.6), если необходимо, так, чтобы после стерилизации он соответствовал pH (7,4±0,2) при температуре 25 °C.
Разливают среду в соответствующих количествах в колбы или склянки (6.7).
Стерилизуют в течение 15 мин в автоклаве (см. 6.1) при температуре 121 °C.
5.1.1.1 Раствор новобиоцина
Состав:
Новобиоцин | 0,45 г | |||
Дистиллированная вода | 100 см* | |||
________________
* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.
Приготовление раствора:
Растворяют новобиоцин в воде и стерилизуют фильтрованием через микропористую мембрану.
Готовят раствор перед определением.
5.1.1.2 Приготовление готовой среды
Непосредственно перед применением в среду (см. 5.1.1) добавляют 1 см или 4 см
раствора новобиоцина (см. 5.1.1.1) или к 225 см
, или к 900 см
охлажденной среды mTSB (см. 5.1.1).
Конечная концентрация новобиоцина равна 20 мг/дм среды mTSB.
5.2 Первая селективная среда для выделения микроорганизмов: агаровая среда
Мак-Конки с сорбитом и суплементом СТ (цефиксим и теллурит калия) (CT-SMAC)
5.2.1 Основная среда
Состав: