5.1 Общие положения
В лабораторной практике применяют ISO 7218, ISO/TS 11133-1 и ISO/TS 11133-2.
5.2 Разведение - по ISO 6887 (все части), ISO 8261 и любой конкретный стандарт, распространяющийся на анализ продукции.
5.3 Жидкая селективная обогатительная среда: триптон-соевый полимиксиновый бульон (TSPB) по [1].
5.3.1 Основа среды
5.3.1.1 Состав
Наименование компонента | a) | b) |
Продукт ферментативного переваривания казеина, г | 34,0 | 17,0 |
Продукт ферментативного переваривания сои, г | 6,0 | 3,0 |
Хлорид натрия (), г | 10,0 | 5,0 |
Глюкоза, г | 5,0 | 2,5 |
Фосфорнокислый калий двузамещенный (), г | 5,0 | 2,5 |
Вода, см | 1000 | 1000 |
5.3.1.2 Приготовление
Ингредиенты или готовую основу среды растворяют в воде, нагревают на слабом огне до кипения и кипятят 2-3 мин при постоянном перемешивании. При необходимости корректируют pH так, чтобы после стерилизации он был равен 7,3±0,2 ед. pH при температуре 25 °C.
Среды распределяют в объеме по 10 см [среда двойной концентрации (5.3.1.1 a)] и по 9 см [среда нормальной концентрации (5.3.1.1 b)] в пробирки размером 16 мм160 мм (6.7).
Стерилизуют в автоклаве (6.1) при температуре 121 °C в течение 15 мин.
5.3.2 Раствор сульфата полимиксина B
5.3.2.1 Состав
Сульфат полимиксина B, ЕД активности (или г) | 500000 (или 0,05) |
Вода, см | 50 |
5.3.2.2 Приготовление
Сульфат полимиксина B растворяют в воде. Стерилизуют путем фильтрации.
5.3.3 Полная среда
Непосредственно перед использованием добавляют 0,2 см (для среды двойной концентрации) или 0,1 см (для среды нормальной концентрации) раствора сульфата полимиксина B (5.3.2) в каждую пробирку, содержащую основу среды (5.3.1).
5.3.4 Проверка эксплуатационных характеристик с целью гарантии качества питательной среды