ГОСТ ISO/TS 15495/IDF/RM 230-2012 Молоко. Молочные продукты и питание для детей раннего возраста. Руководящие указания для количественного определения меламина и циануровой кислоты методом жидкостной хроматографии - тандемной масс-спектрометрии (LC-MS/MS)

Приложение А
(справочное)

     
Пример А - Коровье молоко и сухие молочные смеси для детей раннего возраста. Одновременное количественное определение меламина и циануровой кислоты методом жидкостной хроматографии с ионизацией электрораспылением и тандемной масс-спектрометрии

А.1 Область применения

В данном приложении установлен подтвержденный внутри лаборатории метод количественного определения меламина и циануровой кислоты в коровьем молоке и сухих молочных смесей для детей раннего возраста методом жидкостной хроматографии с ионизацией электрораспылением и тандемной масс-спектрометрии (LC-MS/MS) с использованием режима мониторинга выбранных реакций.

Положительная идентификация меламина и циануровой кислоты в пробе проводится согласно критериям подтверждения по [1].

Количественное определение осуществляют с помощью изотопного разбавления, используя меченый (, )-меламин и меченую (,)-циануровую кислоту в качестве внутренних стандартов (IS). Дополнительные технические подробности можно найти в данных валидации и результатах квалификационных испытаний, см. ссылку [3].

Метод позволяет осуществить точное количественное определение при следующих сообщаемых пределах, и более:

a) содержание меламина и циануровой кислоты в коровьем молоке при массовой концентрации от 0,05 до 0,10 мг/кг соответственно;

содержание меламина и циануровой кислоты в молочных смесях для детей раннего возраста при массовой концентрации от 0,05 мг/кг до 0,10 мг/кг, соответственно;

b) содержание меламина и циануровой кислоты в молочных смесях для детей раннего возраста при массовой концентрации 1,00 мг/кг.

А.2 Термины и определения

См. раздел 3.

А.3 Сущность метода

Методика анализа включает разбавление пробы в водном растворе ацетонитрила, что приводит к осаждению. После центрифугирования надосадочную жидкость анализируют методом LC-MS/MS в режиме SRM, работая как в режиме ионизации с получением положительных ионов, так и в режиме ионизации с получением отрицательных ионов. Переключение полярности выполняется в рамках одного опыта.

А.4 Реактивы

Используют реактивы только признанной аналитической чистоты, если нет иных указаний, и дистиллированную или деминерализованную воду или воду равноценной чистоты.

Примечание - Номера по CAS приведены для каждого реактива.

Перед использованием химических веществ см. соответствующие справочники или перечни безопасности, утвержденные в установленном порядке.

А.4.1 Вода для хроматографического анализа (CAS No. 7732-18-5).

А.4.2 Ацетонитрил (), градиентной чистоты для хроматографического анализа (CAS No. 75-05-8).

А.4.3 Ацетат аммония (), GR для анализа (CAS No. 631-61-8).

А.4.4 Циануровая кислота , массовая доля >98% (CAS No. 108-80-5).

А.4.4.1 Исходный стандартный раствор циануровой кислоты, массовой концентрацией 0,25 мг циануровой кислоты на кубический сантиметр.

Берут навеску с точностью до 0,1 мг, 63,8 мг циануровой кислоты (А.4.4) в мерную колбу с одной меткой вместимостью 250 см (А.5.12), сделав соответствующую поправку на примеси согласно результатам анализа, приведенным в сертификате. Растворяют и доводят до метки водой (А.4.1). Примерно в течение 15 мин воздействуют ультразвуком до полного растворения.

Хранят исходный стандартный раствор циануровой кислоты при комнатной температуре в защищенном от света месте. Свежий исходный стандартный раствор готовят еженедельно.

А.4.4.2 Рабочий раствор циануровой кислоты I, соответствующий массовой концентрации 20 мкг циануровой кислоты на кубический сантиметр.

Пипеткой добавляют 4 см исходного стандартного раствора циануровой кислоты (А.4.4.1) в мерную колбу с одной меткой вместимостью 50 см (А.5.12). Доводят до метки водой (А.4.1) и перемешивают. Рабочий раствор I циануровой кислоты хранят при комнатной температуре в защищенном от света месте. Свежий рабочий раствор I готовят еженедельно.

А.4.4.3 Рабочий раствор циануровой кислоты II, соответствующий массовой концентрации 2 мкг циануровой кислоты на миллилитр.

Пипеткой добавляют 1 см рабочего раствора I циануровой кислоты (А.4.4.2) в мерную колбу с одной меткой вместимостью 10 см (А.5.12). Доводят до метки водой (А.4.1) и перемешивают. Рабочий раствор II циануровой кислоты хранят при комнатной температуре в защищенном от света месте. Свежий рабочий раствор II готовят еженедельно.