ГОСТ 31504-2012 Молоко и молочная продукция. Определение содержания консервантов и красителей методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (Издание с Поправкой)

     9 Определение массовой концентрации синтетических красителей

9.1 Подготовка к проведению определения

9.1.1 Приготовление буферного раствора

(1,300±0,001) г дигидрофосфата натрия и (1,000±0,001) г гексадецил-3-метиламмонийбромида растворяют в 200-300 см бидистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 см, перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора при комнатной температуре в плотно закрытой стеклянной таре - не более 1 мес.

9.1.2 Приготовление основного раствора смеси пяти синтетических красителей массовой концентрации 100 мкг/см

Пробу синтетических красителей для приготовления основного раствора рассчитывают с учетом содержания основного действующего вещества таким образом, чтобы конечное содержание каждого красителя в смеси основного стандартного раствора составляло 100 мкг/см. Например, при содержании основного действующего вещества для индигокармина 95%, желтого "Солнечный закат" - 90%, тартразина - 94,6%, понсо 4R - 75% и азорубина - 50% масса пробы синтетического красителя составит соответственно: (0,105±0,001) г; (0,110±0,001) г; (0,106±0,001) г; (0,130±0,001) г и (0,200±0,001) г.

Пробы синтетических красителей помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см, добавляют 200-300 см бидистиллированной воды и перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора - не более 7 сут.

9.1.3 Приготовление рабочего раствора смеси пяти синтетических красителей массовой концентрации 10 мкг/см

10 см основного раствора, приготовленного по 9.1.2, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см, добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

9.1.4 Приготовление градуировочных растворов смеси пяти синтетических красителей

Градуировочные растворы смеси пяти синтетических красителей готовят по схеме, представленной в таблице 1.

Таблица 1

Части рабочего раствора смеси пяти синтетических красителей массовой концентрации 10 мкг/см переносят в мерные колбы вместимостью 100 см, добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

9.1.5 Установление градуировочной характеристики

Каждый рабочий раствор хроматографируют по два раза, начиная с наименьшей концентрации, принимая за результат среднеарифметическое значение двух параллельных измерений.

Условия хроматографирования:

- объем вводимой пробы - 0,02 см;

- состав подвижной фазы: А - буферный раствор, В - ацетонитрил;

- скорость потока элюента - 0,7 см/мин.

Условия градиентного элюирования представлены в таблице 2.

Таблица 2