ГОСТ 31480-2012 Комбикорма, комбикормовое сырье. Определение содержания аминокислот (лизина, метионина, треонина, цистина и триптофана) методом капиллярного электрофореза (с Поправкой)

     7 Определение содержания триптофана

7.1 Средства измерения, оборудование, материалы и реактивы

Для проведения измерения дополнительно к указанным в 6.1 должны применяться:

стаканы В(Н)-1-1000ТС по ГОСТ 25336;

колбы с тубусом вместимостью 1000 см по ГОСТ 25336;

воронка Бюхнера по ГОСТ 9147;

кислота серная по ГОСТ 4204, раствор молярной концентрации (HSO)=2 моль/дм;

спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 18300;

индикатор метиловый красный;

бария гидроокись 8-водная по ГОСТ 4107;

стандарт триптофана (в форме DL- или L-оптического изомера), сухое вещество, квалификации не ниже ч., "Флука", Швейцария.

Примечание - Требования к обработке посуды и использованию оснастки, необходимой для выполнения измерений, - в соответствии с приложением А.

7.2 Подготовка к измерению

7.2.1 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации (HCI)=1 моль/дм - по 6.2.1.1.

7.2.2 Приготовление раствора гидроокиси натрия молярной концентрации (NaOH)=0,5 моль/дм - по 6.2.1.2.

7.2.3 Приготовление насыщенного раствора гидроокиси бария для гидролиза

Навеску 8-водного кристаллогидрата гидроокиси бария массой 480 г помещают в химический стакан вместимостью 1000 см, добавляют 780 см дистиллированной воды и осторожно нагревают до насыщения при температуре от 75 °С до 80 °С. Горячий раствор фильтруют через обеззоленный фильтр "синяя лента" с помощью воронки Бюхнера и колбы с тубусом и переливают в емкость из термостойкого стекла для хранения.

Раствор в горячем виде (нагревают до растворения осадка) применяют на стадии гидролиза проб. При отборе аликвотной порции горячего раствора необходимо использовать стеклянные пипетки или одноразовые полипропиленовые наконечники от микродозаторов (последние меняют после каждого отбора горячего раствора гидроокиси натрия).

7.2.4 Приготовление раствора серной кислоты молярной концентрации (HSO)=2 моль/дм

5,5 см концентрированной серной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 50 см с 10-15 см дистиллированной воды, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. Раствор используют для нейтрализации, срок хранения не ограничен при комнатной температуре.

7.2.5 Приготовление раствора метилового красного массовой концентрации 0,5 мг/см

50 мг метилового красного помещают в мерную колбу вместимостью 100 см, приливают 30 см этилового спирта, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. Хранят в стеклянной посуде. Срок хранения не ограничен при комнатной температуре.

7.2.6 Приготовление раствора тетраборнокислого натрия молярной концентрации (NaBO·10HO)=0,05 моль/дм - по 6.2.1.3.

7.2.7 Приготовление раствора тетраборнокислого натрия молярной концентрации (NaBO·10HO)=0,02 моль/дм - по 6.2.2.1.

Раствор тщательно перемешивают и используют:

- для кондиционирования капилляра;

- для хранения капилляра в нерабочее время;

- в качестве раствора ведущего электролита (рабочего буферного раствора).

7.2.7.1 Подготовка рабочего буферного раствора - по 6.2.2.3.