ГОСТ 31669-2012 Продукция соковая. Определение сахарозы, глюкозы, фруктозы и сорбита методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (Издание с Поправками)

     7 Проведение измерений методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

7.1 Условия хроматографического анализа

Колонка аналитическая: длиной 300 мм и внутренним диаметром 6,5 мм, заполненная сульфированным сополимером полистирола и дивинилбензола в кальциевой ионной форме, размер частиц 30 мкм по 4.3.

Элюент: раствор Са-ЭДТА 0,03-0,1 ммоль/дм по 4.19 или вода по 4.18.

Температура колонки: 80°С - 90°С (или рекомендуемая производителем колонки).

Детектирование: рефрактометрическое.

Скорость потока подачи элюента: 0,5 см/мин (или рекомендуемая производителем колонки).

Объем вводимой пробы: 10-20 мкл (объем вводимой пробы выбирают в соответствии с техническими характеристиками рефрактометрического детектора при оптимизации метода).

Пример хроматограммы модельной смеси сахарозы, фруктозы, глюкозы и сорбита приведен в приложении А.

7.2 Условия проведения измерений

Температура окружающего воздуха - (25±5)°С;

атмосферное давление - (97±10) кПа;

относительная влажность - (65±15)%;

частота переменного тока - (50±5) Гц;

напряжение в сети - (220±10) В.

7.3 Построение градуировочной зависимости

Проводят хроматографический анализ всех градуировочных растворов смеси сахарозы, глюкозы, фруктозы и сорбита.

Регистрируют площади пиков отдельных сахаров и строят градуировочный график - зависимость площади пика от массовой концентрации или массовой доли сахаров в градуировочном растворе.

Процедуры построения градуировочной зависимости выполняют в соответствии с руководством по эксплуатации оборудования и руководством пользователя программным обеспечением.

Градуировочную зависимость выражают линейным уравнением:

.                                                               (1)

Правильность построения градуировочной зависимости контролируется величиной достоверности аппроксимации :

.

Из уравнения (1) следует, что площадь пиков градуировочных растворов сахаров и сорбита (mV·c или V·c) и их массовая концентрация или массовая доля (г/дм или ‰) находятся в соответствующей функциональной зависимости:

,                                                                      (2)

где - градуировочный коэффициент (г/дм/ mV·c)