Методические указания по санитарно-гигиенической оценке резиновых и латексных изделий медицинского назначения

     7.2.1. Краткое описание метода /2-6/

Тонкослойная хроматография занимает особое место среди методов разделения, благодаря простоте и доступности оборудования. ТСХ - вид жидкостной хроматографии, в которой роль подвижной фазы (ПФ) выполняет жидкая фаза, а разделение смеси веществ происходит на тонком слое сорбента по мере ее продвижения. Анализируемые вещества наносят на линию старта на расстоянии 1,5-2 см от края хроматографической пластинки в виде концентрированных пятен диаметром не более 0,5 см или полосок длиной 8-10 мм, шириной 2-4 мм. Справа и слева от пробы наносят растворы "свидетелей" - аликвотные части стандартных растворов искомых веществ в количествах, соответствующих диапазону определяемых концентраций анализируемых соединений. Разделение проводят в хроматографической камере, на дно которой налит слой ПФ толщиной 0,5 см. После подъема ПФ примерно на 10 см пластинку вынимают, отмечают границу подъема ПФ (линия фронта растворителя) и сушат на воздухе. Определяемые вещества на пластинке обнаруживают двумя способами:

1) пластинку просматривают в УФ свете при длинах волн 254 или 366 нм, отмечая цвет и контуры светящихся пятен;

2) пластинку опрыскивают (проявляют) соответствующим для каждого класса соединений проявляющим реагентом. Определяемые вещества проявляются в виде окрашенных пятен. Положение пятен на хроматограмме характеризуется величиной .

- является качественной характеристикой положения вещества, специфичной для него в выбранных хроматографических условиях. - это отношение расстояния между стартом и центром зоны (пятна) к расстоянию от старта до фронта растворителя. На рис.1 представлена хроматограмма и расчет величины .

Рис.1 Схема разделения смеси вещества

А - линия старта; Б и Б - центры локализации зон (пятен) веществ; В - линия фронта; 1, 2 - точки нанесения индивидуальных веществ ("свидетелей"); 3 - точка нанесения смеси веществ 1 и 2

                            

Идентификацию веществ проводят путем сравнения окраски пятен и величины пробы с окраской пятен и величины "свидетелей". Наличие на пластинке при хроматографировании пробы пятна, совпадающего по величине и окраске с пятном "свидетеля" указывают на присутствие искомого соединения.