1.1. Настоящие методические указания предназначены для экспресс-определения микотоксинов в пробах зерна, кормов и компонентов для их производства методами иммунохимического анализа.
1.2. В основе процедуры анализа лежит взаимодействие антигенов с антителами. Специфическое иммунохимическое взаимодействие происходит в объеме иммуносорбента (колонки Aflascan, Ochrascan), в объеме и на поверхности полистиролового планшета (Aflaplate, Ridascreen), на поверхности мембраны (Aflacard, Ochracard) или в капиллярных каналах иммунохроматографической полоски (Rida Quick). В процессе реакции антигены (микотоксины), содержащиеся в экстрактах исследуемых образцов, образуют комплекс со специфическими антителами. Иммуносорбированные микотоксины затем эллюируются денатурирующим растворителем и наблюдаются по собственной флуоресценции (Aflascan, Ochrascan), детектируются путем непрямого конкурентного иммуноферментного анализа (Aflaplate, Ridascreen, Aflacard, Ochracard), либо методами иммунохроматографии (Rida Quick).
1.3. Основными компонентами реакции являются антигены (микотоксины), содержащиеся в экстрактах испытуемых образцов, специфические антитела к определяемым антигенам и коньюгаты определяемых антигенов с пероксидазой или коллоидным золотом.
1.4. При выборе процедуры исследования руководствуются таблицами 1-8.
Таблица 1. Определение суммы афлатоксинов B1, В2, G1 и G2
Метод | Результат | Предел | Время | |
Aflascan | Флуоресценцентный | Полуколичественный | 0,001-0,01 | 45-15 |
Aflacard Total | Иммуноферментный | Полуколичественный | 0,004-0,03 | 30 |
Aflacard T | Иммуноферментный | Полуколичественный | 0,02 | 15 |
Ridascreen Aflatoxin EXPRESS | Иммуноферментный | Полуколичественный | 0,02 | 20 |
Ridascreen FAST Aflatoxin | Иммуноферментный | Количественный | 0,0017 | 30 |
Ridascreen FAST Aflatoxin SC | Иммуноферментный | Количественный | 0,002 | 30 |
Таблица 2. Определение афлатоксина В1
Метод | Результат | Предел | Время | |
Aflacard B1 | Иммуноферментный | Полуколичественный | 0,002-0,1 | 30 |
Aflaplate | Иммуноферментный | Количественный | 0,0015 | 30 |
Ridascreen Aflatoxin B1 30/15 | Иммуноферментный | Количественный | 0,001 | 90 |
Таблица 3. Определение охратоксина А
Метод | Результат | Предел | Время | |
Ochrascan | Флуоресценцентный | Полуколичественный | 0,002-0,02 | 30 |
Ochracard | Иммуноферментный | Полуколичественный | 0,003-0,01 | 30 |
Ridascreen FAST Ochratoxin | Иммуноферментный | Количественный | 0,005 | 30 |
Ridascreen Ochratoxin | Иммуноферментный | Количественный | 0,000625 | 240 |
Таблица 4. Определение цитринина
Метод | Результат | Предел обнаружения, мг/кг | Время исследования, мин | |
Ridascreen FAST Citrinin | Иммуноферментный | Количественный | 0,05 | 30 |
Таблица 5. Определение дезоксиниваленола (ДОН)
Метод | Результат | Предел | Время | |
Rida Quick DON | Иммунохроматографический | Полуколичественный | 1,0 или 2,0 | 15 |
Ridascreen DON EXPRESS | Иммуноферментный | Полуколичественный | 0,5 | 20 |
Ridascreen FAST DON | Иммуноферментный | Количественный | 0,2 | 30 |
Ridascreen DON | Иммуноферментный | Количественный | 0,0185 | 60 |