ГОСТ Р ЕН 14130-2010 Продукты пищевые. Определение витамина С с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии
4 Реактивы
4.1 Общие положения
При проведении анализа, если не оговорены другие условия, используют только реактивы установленной аналитической чистоты для ВЭЖХ-анализа и воду не ниже первой степени чистоты по ЕН ИСО 3696 или воду, подвергнутую дополнительной дистилляции.
4.2 Реактивы и растворы
4.2.1 Кислота метафосфорная (НРО)
.
4.2.2 Натрий фосфорнокислый трехзамещенный (тринатрийфосфат) с массовой долей (Na
PO
·12Н
О)
98,0%.
4.2.3 Калий фосфорнокислый однозамещенный с массовой долей (KH
PO
)
98,0%.
4.2.4 L-цистеин с массовой долей (C
H
NO
S)
99,0% или другой приемлемый восстанавливающий реактив.
4.2.5 N-цетил-N,N,N-триметиламмонийбромид (цетримид) с массовой долей (C
H
BrN)
99,0%.
4.2.6 Метанол для ВЭЖХ с массовой долей (CH
O)
99,9%.
4.2.7 Раствор метафосфорной кислоты массовой концентрацией ((НРО
)
)=200 г/дм
200 г метафосфорной кислоты (см. 4.2.1) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 дм, объем содержимого доводят водой до метки. Срок годности раствора 1 мес при температуре 4 °С.
4.2.8 Раствор метафосфорной кислоты массовой концентрацией ((НРО
)
)=20 г/дм
50 см метафосфорной кислоты (см. 4.2.7) переносят пипеткой в мерную колбу вместимостью 500 см
, объем содержимого доводят водой до метки. Раствор готовят в день проведения анализа.
4.2.9 Раствор натрия фосфорнокислого трехзамещенного массовой концентрацией (Na
PO
·12Н
О)=200 г/дм
200 г тринатрийфосфата (см. 4.2.2) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 дм, объем содержимого доводят водой до метки.
4.2.10 Раствор L-цистеина массовой концентрацией (C
H
NO
S)=40 г/дм
20 г цистеина (см. 4.2.4) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 500 см, объем содержимого доводят водой до метки. Раствор готовят в день проведения анализа.
4.2.11 Подвижная фаза для ВЭЖХ
Раствор А
13,6 г однозамещенного фосфата калия (см. 4.2.3) растворяют в стакане в 900 см воды. Раствор фильтруют через мембранный фильтр размером пор 0,45 мкм.
Раствор В
100 см цетримида (см. 4.2.5) растворяют в стакане в 100 см
метанола (см. 4.2.6). Раствор фильтруют через мембранный фильтр размером пор 0,45 мкм.
Приготовленные растворы смешивают, используя 900 см раствора А и 100 см
раствора В. Полученную подвижную фазу для ВЭЖХ при необходимости перед употреблением дегазируют.
4.2.12 Крахмал (применяется по выбору пользователя), раствор массовой концентрацией 1 г/100 см.
4.2.13 Йод (применяется по выбору пользователя), раствор концентрацией (I
)=0,05 моль/дм
.
4.2.14 Кислота серная, раствор концентрацией (H
SO
)=0,1 моль/дм
.
4.3 Стандартные вещества
4.3.1 Кислота аскорбиновая (L(+)-аскорбиновая) с массовой долей (C
H
O
)
99,0%
(R)-5-[(S)-1,2-дигидроксиэтил]-3,4-дигидрокси-5-Н-фуран-2-он.