Статус документа

ГОСТ Р 54063-2010 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Методы определения безвредности

18 Предварительные испытания

Для проверки точности или валидации испытания турбидиметрическим методом либо хромогенным методом проводят предварительные испытания, позволяющие убедиться в надежности критериев для стандартной кривой и в том, что испытуемый раствор не является мешающим фактором для проведения испытания.

Валидация методики испытаний необходима, если в условия эксперимента внесены какие-либо изменения, которые могут повлиять на результаты испытания.

18.1 Проверка надежности критериев для стандартной кривой

Готовят не менее трех разведений раствора стандартного препарата эндотоксина для построения стандартной кривой. Проводят испытание, используя не менее трех параллельных рядов каждого разведения раствора стандартного препарата эндотоксина, в соответствии с рекомендациями производителя ЛАЛ-реактива (объемные соотношения, время инкубирования, температура, рН и т.п.).

Если при проведении испытания кинетическим методом необходимый интервал превышает 2 логарифма, включают дополнительные разведения стандартного препарата эндотоксина, для того чтобы разграничить каждое повышение логарифма на единицу в интервале значений стандартной кривой. Абсолютное значение коэффициента корреляции должно быть выше или равно 0,980 для интервала концентраций эндотоксинов, указанных производителем лизата.

18.2 Испытание на наличие мешающих факторов

Выбирают значение концентрации эндотоксинов, лежащее в середине интервала значений стандартной кривой или близкое к этому значению.

Готовят растворы , , и , как показано в таблице 5.

Таблица 5 - Схема эксперимента "Мешающие факторы"


Раствор	Концентрация эндотоксинов	Раствор, к которому добавлен эндотоксин	Количество повторностей
	Отсутствует	Испытуемый раствор	Не менее 2
	Средняя концентрация на стандартной кривой	Испытуемый раствор	Не менее 2
	Не менее трех концентраций (самую низкую концентрацию обозначают )	Вода для ЛАЛ-теста	Каждая концентрация не менее 2
	Отсутствует	Вода для ЛАЛ-теста	Не менее 2
Примечания 1 Раствор - испытуемый раствор, который следует разводить до значения, не превышающего МДР. 2 Раствор - испытуемый образец в том же разведении, что и раствор , содержащий прибавленные эндотоксины в концентрации, равной значению средней концентрации на стандартной кривой или близкой к ней. 3 Раствор - раствор стандарта эндотоксина в концентрациях, используемых при валидации метода, в соответствии с 18.1 (проверка надежности критериев для стандартной кривой (положительные контроли). 4 Раствор - вода для ЛАЛ-теста (отрицательный контроль).

Проводят испытание не менее чем в двух параллельных пробах этих растворов в соответствии с рекомендациями производителя лизата (объем испытуемого раствора и раствора лизата, объемное соотношение испытуемого раствора и раствора лизата, время инкубирования и т.п.)

Вычисляют среднее значение количества добавленных эндотоксинов, вычитая среднюю концентрацию эндотоксинов в растворе (если они присутствуют) из средней концентрации эндотоксинов в растворе, содержащем добавленные эндотоксины.

Испытуемый раствор не содержит мешающих факторов, если в условиях проведения испытания измеренная концентрация эндотоксинов, прибавленных в испытуемый раствор, находится в интервале от 50% до 200% известной концентрации эндотоксинов после вычитания концентрации эндотоксинов, обнаруженных в растворе без добавленных эндотоксинов.

Если значение содержания эндотоксинов находится за пределами указанного интервала, мешающие факторы следует удалить, как описано в 13.5. Эффективность обработки контролируют посредством проведения повторного испытания на наличие мешающих факторов.

18.3 Проведение испытания

Испытания проводят в соответствии с методикой, описанной в 18.1.