ГОСТ Р 54063-2010 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Методы определения безвредности

     11 Определение аллергизирующего действия лекарственного средства

Аллергизирующее анафилактическое действие лекарственного средства определяется путем сенсибилизации морских свинок.

Для сенсибилизации морских свинок (масса 200-250 г) могут быть использованы разные схемы введения лекарственного средства. В случаях, когда курс вакцинации предусматривает несколько введений, целесообразно применять следующую схему: первая инъекция подкожно, две последующие (с интервалом 1 сут) внутримышечно. Если вакцинация предусматривает введение лекарственного средства однократно, допускается однократная сенсибилизация. Число животных в группе должно быть не менее десяти. Разрешающую инъекцию выполняют внутривенно или внутрисердечно через две-три недели или в более отдаленный срок (в зависимости от свойств лекарственного средства). В случае, если препарат является сорбированным, для разрешающей инъекции следует использовать также и несорбированный полуфабрикат. Сенсибилизирующая и разрешающая дозы испытуемого лекарственного средства должны быть приближены к рекомендуемым для практического применения, при этом разрешающая доза не должна быть меньше сенсибилизирующей. Окончательную величину дозировок устанавливают экспериментальным путем.

После разрешающей инъекции наблюдение за животными ведут в продолжение 30 мин. Чаще всего шок проявляется в течение нескольких минут, его тяжесть оценивают по следующей шкале:

А/+/ - редкое почесывание лапами морды, взъерошивание шерсти, понижение температуры более чем на 1 °С;

Б/++/ - частое почесывание лапами морды, возможно периодическое чихание, понижение температуры;

В/+++/ - спастический кашлевый синдром, возможное падение на бок, мочеиспускание, дефекация;

Г/++++/ - конвульсивные судороги, резкое нарушение дыхания, гибель животного в течение первых 5-7 мин;

Д - реакция отсутствует.

Индекс синдрома в группе (И) вычисляют по формуле Веигла (1960)

,                                                    (1)

где , , , , - число животных с данной выраженностью синдрома;

, , , - цифровая индикация, которая вводится для исчисления тяжести реакции по группе в целом.

Изучаемые лекарственные средства (за исключением гетерологичных сывороток) не должны вызвать развития смертельного шока.

Выраженность анафилаксии после внутривенного или внутрисердечного введения разрешающей дозы препарата должна соотноситься с результатами, зафиксированными в группе морских свинок, подготовленных к шоку, чаще всего сенсибилизацией нормальной гетерологичной сывороткой (положительный контроль). 100%-ная гибель животных в данной группе обычно наступает в результате предварительного подкожного введения 0,1 см лошадиной сыворотки, за две-три недели до разрешающей дозы 0,1-0,5 см. Если сыворотка лиофилизирована, для сенсибилизации применяют 2,5-3,0 мг на 100 г массы тела животного (разрешающая доза 14-16 мг на 100 г массы). В тех случаях, когда при производстве лекарственного средства применяют гетерологичный белок, его используют при постановке положительного контроля.

Одновременно разрешающую дозу испытуемого лекарственного средства вводят животным, которым вместо сенсибилизирующих инъекций препарата был введен соответствующий объем 0,9%-ного изотонического раствора натрия хлорида (отрицательный контроль).